SPECYFICZNOŚĆ ENZYMU

Specyficzność substratowa

 określa, jaki rodzaj substratu ulega

przemianie przy udziale danego enzymu

 zależy od budowy miejsca wiązania

Specyficzność działania

 katalizowanie reakcji tylko jednego typu

 katalizowanie tylko jednego z wielu możliwych przekształceń danej substancji

(cz. białkowa enzymu)

 zależna od budowy centrum katalitycznego

Specyficzność w stosunku do substratu (specyficzność substratowa)

a)zdolność do wiązania tylko określonych substratów i katalizowania reakcji z ich udziałem

b) jest uwarunkowana głównie budową centrum aktywnego (konfiguracją przestrzenną grup wiążących substrat) i jego zdolnością do konformacyjnego dopasowania do substratu

1.) Specyficzność absolutna np. ureaza oksydaza glukozowa

2.)Specyficzność grupowa atakowana jest 1 grupa funkcyjna w grupie pokrewnych związków np. heksokinaza (aldoheksozy– glukozę, mannozę), oksydaza aminokwasowa, dehydrogenaza alkoholowa (różne alkohole – metanol, etanol, butanol), lipaza (estry glicerolu i In. alkoholi)

3.) Stereospecyficzność (s. stereochemiczna) optycznych,)względem: X)szeregu)konfiguracyjnego)L)i)D)np.)oksydaza glukozowa)(6XDXglukoza) X)izomerów)geometrycznych)cis)i)trans)np.)hydroliza)jabłczanowa)(fumaranXcis)nie) maleniaXtrans) X wiązań)α–)i)βX)glikozydowych)np.)α)–)glikozydaza)(maltoza,)nie)celuloza) 4. Specyficzność)względem)położenia)rozkładanego+wiązania:)egzoX)i)endoprotezy,)egzoX)i) EndoX)amylazy 5. Specyficzność)względem)długości+łańcucha+węglowego+w)substracie

Metody oznaczania aktywności enzymów

• metody statyczne

– dwupunktowe – porównanie ilości substratu lub produktu w 2 punktach czasu: w czasie zero i po zakończeniu inkubacji

- należy zapewnić warunki reakcji aby zapewnić stałą szybkość reakcji przez cały czas inkubacji

• metody kinetyczne

- pomiar zmian stężenia substratu lub produktu w jednostce czasu, w początkowym okresie reakcji

- wymagają ciągłej rejestracji zmian stężeń badanego składnika w czasie (pomiar wielopunktowy lub ciągły)