IN VITRO ZAGADANIENIA:
Wyposażenie potrzebne do prowadzenia kultur in vitro: hodowla in vitro, totipotencja, etapy sterylizacji tkanki roślinnej, prowadzenie kultury, pomieszczenia, aparatura, sprzęt laboratoryjny, tok prac technicznych, zadania i skład pożywki, regulatory wzrostu, sporządzanie pożywek, zastosowanie roślinnych kultur tkankowych prowadzonych in vitro
Opis pracy w warunkach sterylnych i metody sterylizacji: sterylizacja, pojęcia np. środki bakteriostatyczne, fizyczne chemiczne i mechaniczne metody wyjaławiania, pakowanie, sterylizacja parowa, autoklawowanie, dekoktacja, tyndalizacja, pasteryzacja, spalanie i opalanie, sterylizacja za pomocą radiacji, wyjaławianie przez filtrację i stosowane filtry, dezynfekcja
Struktura i właściwości komórek roślinnych: komórka, regeneracja, komórki macierzyste, geny specyficzne dla merystemu korzenia, rola microRNA, modyfikacje struktury chromatyny, teoria Kodu Histonowego, komórki zróżnicowane i totipotencjalne
Charakterystyka i typy kultur: zdolności komórek roślinnych (totipotencja, odtwarzanie, kompetencja), mikrorozmnażanie + sposoby, morfogeneza, suplementacja fitohormonowami, tuberyzacja, indeksacja, zarodki somatyczne, komórki kompetentne, suszenie i ot oczkowanie zarodków, typy sztucznych nasion
Zaburzenia rozwojowe i zmienność roślin produkowanych in vitro: zmienność soma klonalna, endoreduplikacjia, fenotypowe efekty zmienności soma klonalnej, czynniki decydujące o zmienności, zaburzenia w hodowli in vitro
Hodowla w pożywce płynnej: kultura zawiesinowa, materiał wykorzystywany w hodowli zawiesinowej, pożywki dla kultur zawiesinowych, sprzęt, systemy hodowli płynnej, hodowle ciągłe, hodowla wstępna, hodowla ustalona, ocena jakościowa i ilościowa kultur zawiesinowych, licznik coultera i cytometr przepływowy, krzywa wzrostu komórek w hodowli płynnej, cytofizjologiczna charakterystyka komórek w hodowli, ocenianie żywotności komórek, frakcjonowanie komórek i inne metody synchronizacji komórek, mikrohodowle, kultury pojedynczej komórki
Krioprezerwacja i inne metody długotrwałego przechowywania materiału biologicznego: bank genów, krioprezerwacja, krioprotektanty, etapy procesu krioprezerwacji, metody krioprezerwacji, skuteczność krioprezerwacji
Uwalnianie roślin od patogenów przy pomocy kultur in vitro: mechanizmy pozbywania się patogenów, procedura uwalniania od wirusów, metody uwalniania od wirusów – termoterapia, krioterapia, chemioterapia, elektroterapia
Hodowla komórek zwierzęcych, charakterystyka komórek linii ustalonych i hodowli pierwotnych: hodowle zwierzęce in vitro, sterylizacja, wyposażenie laboratorium, warunki hodowli, skład pożywek, surowica, rodzaje hodowli komórkowych – hodowle pierwotne, wtórne, ustalone i ciągłe, hodowla adherentna, hodowla płynna, cykl wzrostu komórek, fazy wzrostu komórek w hodowli – lag, log i stacjonarna, zamrażanie, rozmrażanie i przechowywanie hodowli komórkowych
Programowana śmierć komórki w badaniach in vitro: funkcje programowanej śmierci komórki, klasyfikacja typów śmierci komórki – apoptoza, autofagia itp., przebieg i szlaki apoptozy, kaspazy – struktura, substraty, mega kanały mitochondrialne, białka mitochondrialne uczestniczące w procesie apoptozy, białka IAPs, białka Bcl-2, główny regulator apoptozy – białko p53, autofagia – rodzaje, funkcje i skutki deregulacji, katastrofa mitotyczna, nekroptoza alternatywną formą PCD, nekroza i jej przebieg, zaburzenia w procesie PCD, elektroforeza kometowa, TEM, elektroforeza DNA w żelu agarozowym, wyznaczanie stosunku HMW/LMW DNA, DNA ELISA, oznaczanie aktywności kaspazy 3, TUNEL, analiza w mikroskopie fluorescencyjnym, test z aneksyną V, testy przeżywalności komórek – testy ze związkami anionowymi, testy oparte na przechodzeniu przez błonę komórkową drobnocząsteczkowych związków, podwójne barwienie, akumulacja barwników w określonych organellach, określenie aktywności metabolicznej komórki (Test MTT, test LDH)