Inżynieria genetyczna

Ćwiczenie nr I

Cel ćwiczenia

1. Przygotowanie plazmidu pGEX-2T do klonowania – trawienie wektora enzymem restrykcyjnym BamHI.

2. Analiza elektroforetyczna wektora pGEX-2T trawionego enzymem BamHI.

3. Przygotowanie plazmidu pGEX-2T do klonowania – defosforylacja plazmidu zlinearyzowanego enzymem restrykcyjnym BamHI.

Wyniki

	M	K							← 4948 bp
			I	II	III	IV	V	VI
5000 bp →
2000 bp →
850 bp →
400 bp →
100 bp →
	Rys. 1 Wyniki elektroforezy

M – marker wagowy FastRuler^Tm DNA Ladder, Middle Range, (MBI Fermentas)

K – kontrola (2 µl próbki kontrolnej, 8 µl TE, 2 µl 6xSB

I, II, III, IV, V, VI – próbki trawionego wektora pGEX-2T odpowiednich grup

Analiza elektroforetyczna przeprowadzona została w buforze 1xTBE przy stałym napięciu 80 V przez ok. 1 h 30 min. Próbka przygotowana przez naszą grupę została oznaczona symbolem III.