Temat: Hodowla okresowa drożdży
w warunkach beztlenowych.
1 Sporządzenie roztworu:
Do naczynia o pojemności 2l dodałyśmy 5g drożdży, 15g cukru, 1g NH4H2PO4, 1h siarczanu żelaza, 0,1g KHSO4
2 Opis
Pierwsza czynność to sporządzenie roztworu. Następnie został odcięty dostęp tlenu do roztworu.
Cześć I
Dokonanie pomiarów adsorpcji światła przy fali 400 nm:
Do spektrofotometru wprowadzenie kuwety napełnionej wodą destylowaną i wyzerowanie spektrofotometru.
Pomiar adsorpcji światła sporządzonego roztworu.
Czynność powtórzono 4 razy w odstępie czasowym około 30min.
Część II
Dokonanie pomiaru adsorpcji swiatła przy długościach fali od 375nm do 600 nm. Zmiana długości fali o 25 nm.
Do spektrofotometru wprowadzenie kuwety napełnionej wodą destylowaną i wyzerowanie spektrofotometru.
Pomiar adsorpcji światła sporządzonego roztworu.
Czynności powtórzono dla każdego pomiaru (10 pomiarów).
3 Tabela dla części I
Nr pomiaru | czas | absorpcja | Długość fali |
---|---|---|---|
1 | 12:00 | 0,955 | 400 |
2 | 12:34 | 0,537 | 400 |
3 | 13:05 | 0,341 | 400 |
4 | 13:34 | 0,375 | 400 |
Wnioski : Wraz z upływem czasu absorpcja roztworu przez dłuższy czas malała, co może świadczyć o zmniejszaniu stężenia substratu w roztworze (z prawa Lamberta-Beera), przy trzecim pomiarze można zaobserwować niewielki wzrost absorpcji, co za tym idzie stężenia.
Tabela dla cześci II
Nr pomiaru | Długość fali[nm] | Absorpcja |
---|---|---|
1 | 375 | 0,436 |
2 | 400 | 0,407 |
3 | 425 | 0,342 |
4 | 450 | 0,320 |
5 | 475 | 0,300 |
6 | 500 | 0,314 |
7 | 525 | 0,232 |
8 | 550 | 0,295 |
9 | 575 | 0,302 |
10 | 600 | 0,238 |
Wniosek:
Przy zwiększającej się długości fali absorpcja roztworu drożdży zmniejsza się, przy czym nie jest to zależność liniowa i możemy zaobserwować następujące po sobie niewielkie wzrosty i spadki absorpcji. Dzieje się tak dlatego, że zgodnie z prawem Lamberta-Beera im mniejsze stężenie substratu, tym mniejsza absorpcja. Stężenie substratu zmniejsza się przy kolejnych pomiarach, ponieważ jest on zużywany przez stale zwiększającą się ilość komórek drożdży.