14.10.2012

Ogrodnictwo, sem.III, gr.3

SPRAWOZDANIE nr 1

Właściwości aminokwasów i białek

Cel: Celem ćwiczenia było poznanie typowych reakcji, które pozwalają odróżnić wolne aminokwasy od białek, wykryć aminokwasy z grupą hydrosulfidową oraz z pierścieniem aromatycznym. Celem ćwiczenia było również poznanie właściwości białek, które prowadzą do ich denaturacji albo wytrącenia z roztworu.

1. Wykrywanie wolnych aminokwasów

W celu wykrycia wolnych aminokwasów skorzystaliśmy z reakcji ninhydrynowej.

1. Glicyna + ninhydryna –> roztwór zabarwił się na fioletowo

2. Białko + ninhydryna –> wytrącił się pomarańczowy galaretowaty osad

Podczas tej reakcji w probówce zawierającej aminokwas i ninhydrynę (1) powstał fioletowoniebieski produkt.

1. Wykrywanie aminokwasów zawierających pierścień aromatyczny

W celu przeprowadzenia doświadczenia do dwóch próbówek zawierających glicynę i białko dodaliśmy stężony kwas azotowy, a następnie wodorotlenek sodu.

Wynikiem reakcji 1. był bezbarwny roztwór. Wynikiem reakcji 2. było pomarańczowe zabarwienie, charakterystyczne dla reakcji ksantoproteinowej, polegającej na powstaniu nitrowych pochodnych pierścieni aromatycznych pod wpływem kwasu azotowego.

1. Wykrywanie aminokwasów zawierających grupy hydrosulfidowe

Aminokwasy zawierające grupę hydrosulfidową można wykryć z solami ołowiu. Reakcja 1. Po podgrzaniu związki w środowisku zasadowym ulegają hydrolizie, a uwolniona siarka tworzy z jonami ołowiowymi czarny nierozpuszczalny osad PbS. Reakcja 2. Brak grup hydrosulfidowych, roztwór bezbarwny

1. Odróżnianie białek od wolnych aminokwasów

Reakcja 2. – aby wykryć obecność wiązań peptydowych w białkach stosuje się reakcję biuretową Piotrowskiego. Reakcja ta polega na tworzeniu się w środowisku zasadowym fioletowego kompleksu jonów miedziowych z tymi wiązaniami. Wynikiem reakcji 1. Było błękitne zabarwienie roztworu.

1. Koagulacja cieplna białek

wydziela się biały galaretowaty osad

Koagulację białek powoduje rozwinięcie łańcuchów polipeptydowych i łączenie ich w duże agregaty.

1. Wytrącanie białka kwasem

Białko+kwas trichlorooctowy –> wytrąca się biały galaretowaty osad

Stężony kwas powoduje rozluźnienie wiązań wodorowych oraz cofanie się dysocjacji grup karboksylowych i utratę ładunku elektrycznego.

1. Wytrącanie białka solami metali ciężkich

wytrąca się biały galaretowaty osad

Kationy metali ciężkich tworzą z białkami nierozpuszczalne sole, które wytrącają się z roztworu.

1. Wysalanie białka

1. białko kurze + nasycony (NH₄)₂SO₄ –> wytrącenie globulin –>przesączenie przez sączek z bibuły

2. przesącz+(NH₄)₂SO₄ –> przesączenie –> przesącz + CH₃COOH –>ogrzewanie do wrzenia

Wynikiem reakcji był brak osadu, co świadczy o usunięciu białek z roztworu.