Towaroznastwo
Ćwiczenia V
10.12.2011r.
Naturalne subst hamujące znajdujące się w mleku
laktoferyna- wiąże żelazo, które staje się niedostępne dla bakterii
laktoperoksydaza- powoduje utlenianie wyst w mleku tiocyjanów- w obecności H2O2 wytwarzanego przez bakterie związku toksycznego dla bakterii- hipotiocyjanu
lizozym- powoduje uszkodzenie ściany kom, gł bakterii G+
laktotransferyny
aglutyniny- przeciwciała powodujące zlepienie się kom bakteryjnych
1. Antybiotyki (pozostałości po lekach)
2. Subst sanitujące: myjące, dezynfekujące, konserwaty
Metody wykrywania subst hamujących
1.Mikrobiologiczne
a) mikrobiologiczne metody dyfuzyjne z zastosowaniem szczepu testowego Bacillus steorothemophilus var. Clidactis
b) szybki test dyfuzyjny (STD Abiotest)
c) dyfuzyjny test wskaźnikowy- Polutest M
2. Metody enzymatyczne
3. Twim sensor- test paskowy
Ad.1
Skład podłoża suchego w torebce: bulion, glukoza, Agar-agar, purpura bromokrezolowa, przetrwalniki bakterii w ilośc średnio 10 (8 x 10 - 210 ) w 1 m³ podłoża
Kom somatyczne
1) całe lub zniszczone kom nabłonka pęcherzyków przewodów i zatok mlecznych
2) składniki morfotyczne krwi i limfy, gł:
-krwinki białe (leukocyty), w tym: granulocyty (kaso-, zasado- i obojętnochłonne) oraz agranulocyty (limfo- i monocyty)
-krwinki czerwoe (erytrocyty)
-w okresie siarowym spotyka się tzw kom kolostralne
Wzrost LKS w mleku obserwuje się u krów:
-na krótko przed zasuszeniem
-w czasie rui
-chorych na stany zapalne narządów rodnych
-cierpiących na schorzenia kończyn
-zarobaczonych
-żywionych złej jakości paszami (zgniłe)
-przy braku dostatecznej ilości wody
-w czasie upałów w miesiącach letnich
-przy wszelkich bodźcach wywołujących stres i niepokój u zw
Czynniki szkodliwie wpływające na wzrost liczby kom somatycznych
-brud, wilgoc, zimno lub przeciągi w oborze
-urazy mechaniczne wymienia
-drażneinie wymienia w wyniku niesprawnie działającej dojarki i popękanych wewn gum strzykowych
-pustodój lub niedokładne dojenie krowy
Zmiany w składzie chem mleka o podwyższonej liczb kom somat
-obniżenie zawartości s.m. o ok 1-3%
-ogólna zawartośc białek nie ulega zmianie, bądź w niewielkim stopniu wzrasta
-zmniejsza się zawartośc kazeiny z ok 77% do ok 68%, a w chronicznych przypadkach do 50%
-obniżenie zawartości tł o 0,5-1,5%
-obniżenie zawartości laktozy do ok 4,3% a w ostrych stanach zapalnych nawet do 2%
-zmniejsza się koncentracja skł mineralnych: wapnia o 3%, fosforu o 30%, potasu 40%, wit 1-40%
-odczyn mleka jest obojętny lub lekko zasadowy, a kwasowośc miareczkowa obniżona
Badaniami mikrobiolog oceniamy jakośc higieniczną mleka onzaczając ogólną liczb drobnoustr
zanieczyszczenia mleka: mikroflora pierwotna i wtórna
Udział zanieczyszczeń bakteryjnych w 1 ml mleka
-z kanału strzykowego 10-1000
-z powietrza obory 100-15000
-z brudnych strzyków
-niezdezynfekowane urządzenia- najwięcej
Drobnoustroje
-mezofilne (rosnące w temp 30C)
-psychofilne (zimnolubne 6,5-21C)
-termofilne (rosnące w temp powyżej 45C)
Intensywnośc zanieczyszczeń zależy od
-wyjściowej liczby drobnoustrojów w momencie udoju
Jakośc mikrobiolog mleka surowego do skupu
-stan zdrowia krów
-warunki pozyskania i przechowywania
-warunki transportu
Oznaczenie ogólnej liczby drobnoustrojów
1. Metody referencyjne
a) odwoławcza metoda płytkowa
2. Metody rutynowe
a) uproszczona metoda płytkowa
b)metoda Petryfilm
c) metoda instrumentalna: urządzenia Bactoscan, BacTrac
Podłoża do posiewu
1. podstawowe
2. wzbogacone- rozwój drobnoustrojów o wyższych wymaganiach odżywczych
3. wybiórcze- rodzaj tylko wybranych drobnoustrojów
4. różnicujące- odróżnianie poszczególnych drobnoustrojów
Mogą byc stałe, półpłynne i płynne
Cechy pożywki
-jałowa
-musi posiadac odpowiednie wartości odżywcze
-przejżysta
-odpowiednie pH i ciśnienie osmotyczne
Pożywka do oznaczania ogólnej liczby drobnoustrojów
peptan tryptan, ekstrat drożdżowy, glukoza, mleko w proszku
Pożywka z zielenią brylantową i żółcią do oznaczanioa bakterii z gr Coli
rurka w jałowej pożywce, w której nie może byc pęcherzyk powietrza, peptan, laktoza, ekstrat żółci wołowej w proszku
Agar bulionowy z latozą i błękitem chińskim do oznaczania bakterii kwaszących
Metody wyjaławiania sprzętu
termiczne (wyżarzanie i spalanie, suchym gorącym powietrzem, nasyconą parą wodną pod ciśnieneim)
Rozcieńczenia
-pierwsze- zawiesina, roztwór uzyskany po zmieszaniu określonej ilości produktu z dziesięciokrotną ilością rozpuszczalnika
-dziesiętne-
Rodzaje rozcieńczalników
-roztw fizjolog z peptanem
-woda peptonowa
-roztw ortofosforanu jenopotasowego
-roztw ortofosforanu dwupotasowego
-roztw ortofosforanu dwupotasowego z subst antypieniącą
-roztw cytrynianu sodu
Posiew wgłębny
jtk/ml mleka- jednostka tworząca kolonie
L- liczb drobnoustrojów w 1 ml
C- suma koloni na wszystkich płytkach wybranych do liczenia
N1- liczba płytek z 1 rozcieńczenia
N2- liczba płytek z dalszych rozcieńczeń
d- wskaźnik rozcieńczenia odpowiadający pierwszemu (najniższemu) rozcieńczeniu
Zastosowanie płytek Petryfilm
Płytki z gotowym podłożem, na którym wysiewa się próbkę w rozcieńczeniu 10 . inkubacja w 30C przez 48-72h
Miano coli- liczba określająca największe rozcieńczenie, w którym stwierdza się jeszcze bakterie z gr coli