ĆWICZENIE CH-1(Chromatografia cieczowa)
Oznaczanie fenoli w mieszaninie: (fenol, 2-amino -4,6-dinitrofenol,
p - nitrofenol, m -nitrofenol, o-nitrofenol, 1-naftol)
Cel i zakres ćwiczenia
Celem ćwiczenia jest ilościowe oznaczenie składników mieszaniny. Metoda opiera się na fakcie, że wielkość powierzchni piku jest proporcjonalna do stężenia odpowiedniego składnika w mieszaninie.
Aparatura i odczynniki:
chromatograf cieczowy Hewlett Packard Model 1050 z detektorem absorpcji UV
mikrostrzykawka
roztwory wzorcowe fenoli w alkoholu metylowym
roztwór (zadanie) zawierające fenole o nieznanym składzie
kolbki miarowe, pipety, metanol, woda.
Wykonanie ćwiczenia
Należało sporządzić roztwór do analizy. W tym celu odmierzono pipetą 0,5 cm3 badanej mieszaniny fenoli i dopełniono w kolbce miarowej o pojemności 10 cm3 do kreski roztworem składającym się z 60% metanolu i 40% wody. Następnie wykonano chromatogram mieszaniny wstrzykując 20 μl roztworu do chromatografu. Z chromatogramu odczytano na podstawie czasu retencji nazwy poszczególnych składników mieszanin, a na podstawie liczby impulsów każdej substancji odczytano z wykresu (lub z równania) stężenia poszczególnych składników mieszaniny.
Wyniki pomiarów:
Faza ruchoma: 60% MeOH / 40% H2O
Przepływ 1cm3/min ( p ∼ 228 bar )
Nr chromatogramu |
Czas retencji Tr [min] |
Związek |
Pole powierzchni piku *103 |
C [μg/cm3] |
2 |
1,847 |
fenol |
113 |
2,855 |
|
2,392 |
o-nitrofenol |
266 |
1,418 |
|
3,342 |
1-naftol |
273 |
1,457 |
Obliczam stężenia z równań:
Fenol:
O - nitrofenol:
1-naftol:
5. Analiza wyników:
Średnia arytmetyczna zbiorowości próbnej:
fenol:
o-nitrofenol:
1-naftol:
Odchylenie standardowe pojedynczego wyniku
fenol:
m-nitrofenol:
1-naftol:
Odchylenie standardowe średniej arytmetycznej
fenol:
m-nitrofenol:
1-naftol:
Przedział ufności:
95% dla k = 2 tstudenta = 4,303
[ ]
fenol:
m-nitrofenol:
1-naftol:
Stężenia:
fenol:
m-nitrofenol:
1-naftol:
6. Wnioski
Różnice w odczytach różnych próbek tych samych roztworów wynikały prawdopodobnie z niedokładnego odmierzenia mieszaniny fenoli do kolbek, oraz z niedokładnego dopełnienia kolb miarowych do kreski roztworem metanolu. Na końcowy wynik miało wpływ również stosunkowo niskie stężenie poszczególnych składników, oraz czystość kolb użytych do analizy.
Wzory strukturalne:
FENOL
OH
M-NITROFENOL
OH
NO2
1-NAFTOL
OH