sciaga1-mikroby (podloza, farma 2 rok, mikrobiologia, fizjologia bakterii


BAKTERIE dzielimy na:

Bakterie autotroficzne- czerpią węgiel z CO2.

Chemolitotrofy-jako źródło węgla wykorzystuja zw. Organiczne, jako źródło energii- proste zw. Nieorganiczne ( bakterie żelazowe, siarkowe itd. )

Chemoorganotrofy- czerpią energię ze zw. Organicznych

SKŁAD CHEMICZNY KOMÓRKI BAKTERII

- WODA- 80-90% masy

- STAŁE SKŁADNIKI W PRZELICZENIU NA SUCHĄ MASĘ- wegiel-50%, tlen-20%, azot-14%, wodór-8%,fosfor-3%,siarka-1%, potas-1%, sód 1%, wapń, magnez, chlor-0,5% żelazo- 0,2% i inne.

Ze wzgl. Na zapotrzebowanie na tlen, bakterie dzieli się na:

wymagają obecności tlenu np. Micrococcus spp, Pseudomonas spp.

Rosną w warunkach tlenowych i beztlenowych np. E. coli, S. ureus

Ze wzgl. na temperaturę

PODŁOŻE LUB POŻYWKA BAKTERIOLOGICZNA-

To mieszanina różnych związków chemicznych, których skład zapewnia rozwój i rozmnażanie się bakterii a więc prowadzenie hodowli bakterii, izolację określonych gatunków i identyfikację w oparciu o obserwację cech morfologicznych, biochemicznych i serologicznych.

Podział ze wzgl. na skład:

- syntetyczne

- półsyntetyczne

- naturalne

Podział ze wzgl. na konsystencję:

Płynne, półpłynne,stałe

Podział ze wzgl. na ilość i jakość skł. Odżywczych

- proste ( podstawowe)- płynne: bulion zwykły, woda peptonowa

Stałe- agar zwykły, żelatyna

- wzbogacone-płynne:bulion wzbogacony,stałe-agar wzbogacony,agar krwawy,Hintona-Muellera( do oznaczania lekowrażliwości metodą krążkowo-dyfuzyjną )

-wybiórczo-namnażające-płynne;bulion z żółcią,podłoże SF wg. Leifsona(namnażanie np. pałeczek Salmonelli)

-wybiórczo-różnicujące: Levine'a, Chapmana(do hodowli gronkowców),MacConkeya,Sołtysa,Endo,Wilsona-Blaira(tylko pałeczki Salmonelli)

-różnicujące- płynne-Christensena,woda peptonowa z tryptofanem, woda peptonowa z 10%laktozą, z mannitolem, z malonianem stałe-Kligera( bada zdolność do fermentacji glukozy,laktozy,wytwarzania gazów fermentacyjnych,h2s), Simmonsa

-specjalne- Tarrozziego-Wrzoska( do hodowli beztlenowców), podłoże z trioglikolanem sodu, Lowensteina-Jensena( do hodowli prątków), Lofflera, Sabourauda(tylko hodowla grzybów)

TECHNIKI POSIEWU:

1.głębinowa- metodą zalewową

2. powierzchniowa

a. przy użyciu głaszczki

b. redukcyjna

c.murawkowa

krótki szereg biochemiczny:

  1. podłoże kligera- podłoże różnicujące o konsystencji stałej, służy do określania rozkładu glukozy, laktozy, wytwarzania gazu i H2S

  2. woda peptonowa z 10% laktozą pod parafiną

podłoże różnicujące o konsystencji płynnej, służy do określania fermentacji laktozy w warunkach beztlenowych

  1. woda peptonowa z tryptofanem

podłoże różnicujące o konsystencji płynnej, służy do określenia zdolności bakterii do wytwarzania indolu z tryptofanu

  1. woda peptonowa z mannitolem i rurką Durham

podłoże różnicujące o konsystencji płynnej, służy do określania zdolności fermentacji przez bakterie mannitolu z wytworzeniem gazu

5. Podłoże Christemsema

( woda peptonowa z mocznikiem ) jest to podłoże różnicujące płynne, służy do wykrywania enzymu ureazy, mającego zdolność hydrolizy mocznika do amoniaku i CO2

MORFOLOGIA BAKTERII: kształt, wielkość,brzeg,powierzchnia,struktura,wyniosłość ponad powierzchnię,kolor,przejrzystość,konsystencja,zapach, zawieszalność, typ hemolizy na podłożach z krwią

MIKROSKOPY:

1. świetlny(zwykły):

- mechaniczne: podstawa, tubus, korpus, stolik, śruba mikro i makro

- optyczne: źródło, kondensator, okular, obiektyw

- powiekszenie do 1500x

2.ultramikroskop:

- odmiana zwykłego, w ktoróm wykorzystuje się zjawisko Tyndalla

- na ciemnym tle widoczne jasne kształty bakterii

- możliwość oglądania ruchu żywych bakterii

3.kontrastowo-fazowy:

- posiada w budowie diaframe poniżej kondensatora i siatke dyfrakcyjna w obiektywie

- plytka dyfrakcyjna zamienai roznice w zmianie faz na roznice w intensywności swiatla

- można badac anatomie żywych Komorek

4.fluorescencyjny:

- źródłem swiatla jest lampa UV

- preparaty z żywych lub martwych drobnoustr., niebarwionych lub zabarwionych barwnikiem fluorescencyjnym

- rodamina, auramina, prymulina

5. ultrafioletowy

- zdolność rozdzielcza do 100nm

- oglada się po wywolaniu kliszy

- lampa UV

6. elektronowy:

- źródłem elektronow zarzace wlokno metalu

- obraz na ekranie fluoryz lub kliszach

- zdolność rozdzielcza 0,25-0,5nm

- pow 100tys-1mln razy

7.skaninowy:

- przestrzenne obrazy w dużych pow.

- duze zdolności rozdzielcze

ZDOLNOSC ROZDZIELCZA:

- zdolność do odróżnienia szczegółów obserwowanych obiektow

- zalezy od apertury numerycznej i długości fali

- dobre obiektywy NA= 1,3-1,5

IMERSJA:

- zwiekszenie zdoln. Rozdzielczej poprzez zwiekszenie kata skrajnych promieni

- zapelnia się środowisko miedzy prep. A obiektywem olejkiem immersyjnym

KSZTALTY BAKTERII

1. kuliste - COCCI

a) ziarniaki - coccus 1-3mikrometr

b) dwoinki - diplococcus

c) czworaczki - mikrococcus tetragenes

d) sześcianki - sarcina

e) paciorkowce - streptococcus

f) gronkowce - staphylococcus

2. cylindryczne

a) paleczki - bacterium (gram- , brak zarod.)

b) laseczki - bacillus(gram+, zarodniki)

c) maczugowce

d) nitkowe

e) wrzecionowate

3. spiralne

a) krętki - 8mikrometr

b) śrubowce - spirillum 5mikrometr

c) przecinkowce - vibrio 1mikrometr

PLEOMORFIZM - populacja bakterii skladajaca się z Komorek o roznych kształtach

FORMY L BAKTERII:

- bardzo drobne formy, z których w odpowiednich warunkach odradzaja się wegetatywne formy bakterii1. Technika przygotowania preparatu mikroskopowego

a) przygotowanie szkiełek podstawowych

-ze szkła obojętnego - nie uwalniającego zasad

-szkiełka dokładnie umyć roztworze detergentu

-opalić w płomieniu palnika gazowego


b) nakładanie bakterii na powierzchnię szkiełka podstawowego

-z podłoża płynnego bezpośrednio za pomocą ezy

-z podłoża stałego rozprowadzićw kropli soli fizjologicznej

c) zawiesinę rozprowadzić ezą po jak największym obszarze szkiełka
d) szkiełko pozostawić w temperaturze pokojowej do wyschnięcia
e) preparat utrwalić przez 3-krotne przeciągnięcie szkiełka nad płomieniem palnika gazowego
f) barwienie

2. Cel barwienia
Wykazanie obecności bakterii i (lub) grzybów w badanym materiale tzn.stwarza możliwość obserwacji kształtów komórek oraz układów przestrzennych

3. Podział barwników
a) kwaśne (barwny anion, bezbarwny kation) fuksyna kwaśna, eozyna
b) zasadowe (barwny kation, bezbarwny anion) są częściej stosowane fiolet krystaliczny,fuksyna zasadowa,zieleń malachitowa,zieleń brylantowa,błękit metylenowy

4. Podział metod barwienia
a) pozytywna

b) pozytywno-negatywna - można z jej pomocą ukazać obecność otoczek bakteryjnych. W Pierwszej fazie dodajemy fuksyny karbolowej. W kolejnej fazie dodaje się barwnika grubodyspersyjnego np. nigrozyny. Preparat suszy się. W mikroskopie widoczne są czerwono zabarwione komórki na ciemnym tle. Jeżeli bakterie mają otoczki to są one widoczne jako przeźroczystec) negatywna - do żywych bakterii dodaje się grubodyspersyjnego barwnika np. nigrozyny, drugim szkiełkiem robimy rozmaz. Po wysuszeniu widzimy bezbarwne kształty komórek na ciemnym tle.

5. Teorie procesu barwienia

- chemiczna-barwniki zasadowe łączą się z kwaśnymi związkami komórki bakteryjnej (kwasy nukleinowe). Powstaje barwna sól

- fizyczna-barwniki adsorbują się na powierzchni związków chemicznych komórki i przytrzymywane są przez siły elektrostatyczne

STERYLIZACJA proces prowadzący do zniszczenia wszystkich drobnoustrojów DEZYNFEKCJA proces prowadzący do zniszczenia lub usunięcia form wegetatywnych, nie niszczący zarodników METODY STERYLIZACJI 1.Sterylizacja parowa (czynnik sterylizujący nasycona para wodna pod ciśnieniem o temp. ↑100 uzyskiwana w autoklawie; warunki 1 atm., 121,6C, 15 min; 2 atm. 134C 5 min materiał ubrania, materiały opatrunkowe, narządzia chirurgiczne, szkło) 2.Sterylizacja suchym gorącym powietrzem (czynnik sterylizujący suche ciepło 160-200C warunki 170C 1h materiał szkło, porcelana, metale) 3.Sterylizacja gazowa (tlenek etylenu toksyczny, palny, wybuchowy, bezwonny, przenika materiał, formaldehyd niepalny, nietoksyczny, niewybuchowy) 4.Sterylizacja plazmowa (czynnik sterylizujący H2O2 przeprowadzony do postaci pary a następnie plazmy (stan zjonizowany) warunki 35-55C, 1-4h materiał endoskopy, implanty, materiały z tworzyw sztucznych) 5.Sterylizacja radiacyjna (promienie gamma: na skalę przemysłową sprzęt jednorazowy, podłoża, pojemniki promienie UV:dezynfekcja powietrza i powierzchni, fale 250-60 nm, działanie prostolinijne) 6.Inne: spalanie, wyżarzanie, tyndalizacja, filtracja, gotowanie

METODY DEZYNFEKCJI 1.termiczna: komorowo-parowa, komorowa parowo-formalinowa, pasteryzacja, dezynfektory 2.chemiczna Środki dezynfekujące 1.Pochodne fenolu 2.Aldehydy: glutarowy, mrówkowy 3.Glioksal 4.Czwartorzędowe zasady amoniowe 5. Alkohole 6. Biguanidy 7. Pochodne chloru 8.Jod i jodofory 9.KMnO4, H2O2 Cechy środków dezynfekujących szerokie spektrum działania, niskie stężenie przy którym wykazuje aktywność, niska cena, zdrowy dla środowiska, nietoksyczny i nieszkodliwy dla ludzi, nieniszczący powierzchnię, szybko działający - krótszy czas dezynfekcji, szybko odparowywujący (nie wymaga wycierania powierzchni), niepalny i niewybuchowy KONTROLA STERYLIZACJI 1,2.FIZYCZNA I CHEMICZNA za pomocą wskaźników czy urządzenia prawidłowo działają) 3. BIOLOGICZNA informują o osiągnięciu wyjałowienia materiału Sporal A krążek bibuły nasycony zarodnikami Bacilus stearothermophilus, kontrola autoklawu Sporal S krążek bibuły nasycony zarodnikami Bacillus subtilis, kontrola sterylizacji gorącym powietrzem



Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
uk nerwowy cz 2 ściąga, ~FARMACJA, I rok, anatomia - fizjologia, fizjo
Wielka ściąga uk nerwowy III, ~FARMACJA, I rok, anatomia - fizjologia, fizjo
Wielka Ściąga na Anatomię i Fizjologię uk. nerwowy cz 1, ~FARMACJA, I rok, anatomia - fizjologia, fi
ANATOMIA ZALICZONKO - ściąga, ~FARMACJA, I rok, anatomia - fizjologia, fizjo
Fizjologia krwi notatka, ~FARMACJA, I rok, anatomia - fizjologia, fizjo
KREW, ~FARMACJA, I rok, anatomia - fizjologia, fizjo
2uklad krazenia, ~FARMACJA, I rok, anatomia - fizjologia, fizjo
Anatomia i fizjologia uklad nerwowy 3 nots, ~FARMACJA, I rok, anatomia - fizjologia, fizjo
kolokwium serce, ~FARMACJA, I rok, anatomia - fizjologia, fizjo
Układ krążenia notatka, ~FARMACJA, I rok, anatomia - fizjologia, fizjo
skrypt skryptu do fizjo egzamin )), ~FARMACJA, I rok, anatomia - fizjologia, fizjo
Wielka sciaga Biologia z genetyka, ~FARMACJA, I rok, biologia z genetyką
ściąga do AIV, ~FARMACJA, I rok, BIOFIZYKA, Audiometria, A IV ucho
Fizjologia serca notatka, ~FARMACJA, I rok, anatomia - fizjologia, fizjo
3. Budowa komórki bakteryjnej- pytania, farma 2 rok, mikrobiologia, budowa komorki bakteryjnej
Mikrobiologia opis bakteri, Studia, UTP Ochrona środowiska, II rok, Semestr III, Mikrobiologia
Mikroby repetytorium 3 opracowanie pytan, farma 2 rok, mikrobiologia
Grzyby-i-promieniowce, farma 2 rok, mikrobiologia

więcej podobnych podstron