Karolina Lipiec

Przemysław Podsiadlik

Grupa 2

Ochrona Środowiska

Wyznaczanie kinetyki procesów enzymatycznych poprzez pomiar szybkości zużycia tlenu przez mikroorganizmy

Aktywność oddechowa drożdży

Opracowanie wyników:

Objętość r-ru substratu wprowadzona do naczynia pomiarowego [ml]	Stężenie substratu w naczyniu pomiarowym S [mg/l]	Aktywność oddechowa podstawowa AOp [mg O2/dm^3*h]	Aktywność oddechowa z glukozą AOg [mg O2/dm^3*h]	AO = AOp - AOg	1/S	1/AO
1	0,91	21,84	4,00	3,95	1,098901	0,25
2	1,82	20,22	4,67	4,62	0,549451	0,22
3	2,73	35,00	3,33	3,30	0,3663	0,30
4	3,64	18,00	0,67	0,61	0,274725	1,64
5	4,55	33,00	2,33	2,30	0,21978	0,43

Wzór obliczenia stężenia substratu S [mg / l] :

A g - 110ml

x - 1000 ml

x =

Wzór obliczenia aktywność oddechowej :

Korzystaliśmy z szybkości przesuwu [cm/min] i z ilość zużytego tlenu [mg/l]

Aktywność podstawowa, czyli zero glukozy:

B cm - 1 min

C cm - x

x =

AOg - AOp = AO

Wartość K_m:

0 = 0,0092* (-1/Km) + 0,0373

-1/Km = -0,0373 / 0,0092 = - 4,05

Km = -1 / -4,05 = 0,25 [mg/dm³]

Wartość AO_max:

1/AOmax = 0,0373

AOmax = 1/0,0373

AOmax = 26,81 [mg O₂/dm³*h]

Wnioski:

Szybkość maksymalna wyniosła 26,81, a K_m wyniosło 0,25. Punkt przecięcia rzutu wartości K_m­ nie przecina się z wykresem przedstawiającym Kinetykę I-rzędu, a powinno tak być według teorii Michaelisa-Menten. Może to być spowodowane błędami w wykonaniu ćwiczenia (niewłaściwej obsłudze rejestratora i sondy tlenowej, dostaniem się tlenu do naczyńka pomiarowego), błędami w obliczeniach lub nieoptymalnymi warunkami życiowymi drożdży (zbyt wysoka/niska temperatura…). Zgadza się natomiast twierdzenie teorii M-M, że przy pewnej określonej wartości stężenia aktywność oddechowa (prędkość reakcji enzymatycznej) przestaje zależeć od stężenia - zbliża się do wartości prędkości maksymalnej jednak nie jest to już zależność liniowa.

---