Sprawozdanie z ćwiczenia nr 3 / 6 marca 2008

Hanna Puzio

Karolina Sorbian

Agnieszka Radomska

Grupa 2b

Zespół 2

Temat: Kinetyka reakcji enzymatycznych.

1.Wstęp:

Kinetyka enzymów opisuje mechanizmy wiązania substratów przez enzymy oraz ich przekształcania w produkty. Dane wykorzystywane do analizy kinetycznej pochodzą z reakcji enzymatycznych przeprowadzonych w kontrolowanych warunkach umożliwiających śledzenie zmieniających się parametrów w czasie.

Enzymy jak wszystkie katalizatory, obniżają energię aktywacji (E_a lub ΔG^‡) reakcji chemicznej, przyspieszając w ten sposób przebieg reakcji.

Przedmiotem ćwiczenia jest potwierdzenie słuszności równania Briggsa-Haldene'a które zakłada, że w przypadku katalizy za pomocą enzymów kinetyka rozkładu nadtlenku wodoru zależy od stosunku stężenia enzymu, stężenia substratu i temperatury. Celem jest również wyznaczenie wartości liczbowych stałych: Vmax i Km.

2.Tabele wyników i obliczenia:

Czas reakcji, min	Liczba cm^3 0,02 mol/dm^3 roztworu KMnO4	Stężenie roztworu H2O2 [S], mol/dm^3
0	15,75	0,0788
10	6,9	0,0345
20	3	0,015
30	1,75	0,0088
40	1,5	0,075
50	1,2	0,006
60	0,95	0,0048

Obliczanie stężenia molowego [S]:

Obliczanie parametrów xi i zi:

Lp.	xiyi [min]	zi^2[M^2]	yizi [min·M]	xizi [M]	xi^2	(xizi)^2[M^2]
1	0,0000	0,0000	0,0000	0,0000	0,0000	0,0000
2	0,8260	0,0019	0,4400	0,0036	0,0068	0,0000
3	33,1800	0,0041	1,2800	0,1062	2,7523	0,0113
4	65,7600	0,0049	2,1000	0,1534	4,8049	0,0235
5	94,0800	0,0050	2,8400	0,1670	5,5319	0,0279
6	128,7500	0,0053	3,6500	0,1880	6,6306	0,0353
7	167,8800	0,0055	4,4400	0,2071	7,8288	0,0429
Suma	490,4760	0,0268	14,7500	0,8253	27,5553	0,1409

Na podstawie powyższej tabeli, obliczanie parametrów a i b:

Obliczanie wartości stałych występujących w równaniu Briggsa-Haldene'a:

3. Wnioski:

Wysycanie enzymu substratem (zbliżanie się do szybkości maksymalnej) oznacza, że maleje liczba wolnych cząsteczek enzymu, gdyż rośnie ilość tych związanych w kompleksie z substratem (ES). Co można było zauważyć zmniejszającym się stężeniem nadtlenku wodoru (przy stałej temperaturze) wraz z upływem czasu.

---