03

i

I

DEFINICJA WEKTORA - (Łać. ten który wiezie)

O jakie wożenie chodzi w przypadku IG? - o wprowadzenie

wybranego fragmentu DNA do układu, w którym ma on zostać poddany określonemu procesowi np: namnożeniu, integracji lub ekspresji.

Wobec tego wektorem może być każdy fragment kwasu nukleinowego, który zdolny jest spełnić w/w warunek.

Minimalne warunki, które powinien spełniać wektor:

-    w komóce biorcy być zdolnym do namnażania się autonomicznie lub po integracji do DNA biorcy.

-    mieć miejsca cięć restrykcyjnych (najczęściej wymagane pojedyncze) w rejonach nie zakłócających funkcji plazmidu

-    zawierać geny markerowe pozwalające na wyróżnienie komórek w których się znajdują (nie puste)

-    namnażać się w szczepach bakteryjnych niezdolnych do życia poza bardzo zdefiniowanymi warunkami laboratoryjnymi i nie posiadającymi zdolności do koniugacji

ponad to powinien:

-    posiadać miejsce klonowania.(HCS. polilinkcr), charakteryzujące się obecnością wielu unikalnych miejsc restrykcyjnych. Jest to najczęściej syntetyczny oligonukleotyd.

-    posiadać sekwencje umożliwiające spełnianie wektorowi specyficznych funkcji zgodnie z jego przeznaczeniem np:stcrujące w pobliżu miejsca insercji umożliwiające ekspresję insertu! umożliwiające insercję w specyficzne miejsce, amplifikację PCR, sckwencjonowanic i inne

-    posiadać system markerów pozwalających odróżniać różne stany wektora i insertu np: obecność lub nieobecność wektora, zrekombinownny pusty,

-    namnażać się w odpowiedniej ilości kopii na komórkę (przy zahamowanej syntezie DNA gospodarza)

• mieć jak najmniejszą wielkość (umożliwia to wstawienie najczęściej większego insertu)

-    nic posiadać genów, których rozpowszechnienie ni 'globy stanowić

zagrożenie dla innych organizmów_