GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str1

GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str1



104 Rozdział 8

System ten u E. coli indukuje co najmniej cztery białka:

Ada metylotransferazę DNA I. kodowaną przez gen acia,

AlkA - 3-metylo-glikozylazę DNA II kodowaną przez gen alkA\ usuwa 3-metylo adeninę, 3-metylowaną guaninę, eteno-guaninę i 02-metylowa-ne pirymidyny,

AlkB - oksygenazę. która hydroksyluje grupę metylową N3MeC i N'MeA (jednocześnie oksydacyjnie dekarboksylując a-keto-glutaran), hydroksy-lowana grupa metylowa spontanicznie rozpada się z uwolnieniem formaldehydu,

dehydrogenazę izowalerianową koenzymu A, kodowaną przez gen aidB, która w nieznany sposób zwiększa odporność na czynniki alkilujące.

Białko Ada (ang. adaptative response) uwalnia grupy metylowe z 06-mety-loguaniny (06MeG) i 04-metylotyminy (0JMcT) oraz z metylofosfotrójestrów powstających na skutek metylacji grup fosforanowych w szkielecie fosfocukro-wym DNA. Badania wykazały, że grupa metylowa z 06MeG z DNA jest przenoszona na cysteinę (Cys32) enzymu, powodując jego bezpowrotną inaktywację. Przeniesienie grupy metylowej z fosfotrójestru w DNA na cysteinę (Cys69) w łańcuchu białka Ada powoduje, że staje się ono aktywatorem transkrypcji genu ada i pozostałych genów odpowiedzi adaptacyjnej. Metylotransferaza DNA 1 działa w komórce tylko jeden raz, dlatego musi być syntetyzowana w dużych ilościach. W komórkach E. coli występuje drugi enzym metylotransferaza DNA II, kodowana przez gen ogt, wykazuje mniejszą specyficzność wobec substratu i nie usuwa grup metylowych z grup fosforanowych.

Metylotransferazy znaleziono również w komórkach wyższych eukariota, w tym także u człowieka. U ludzi znaleziono jedną metylotransferazę podobną do kodowanej przez gen ogt u E. coli. Enzym usuwa głównie grupę CH3 z 06MeG, w ograniczonym stopniu z 04MeT, nie usuw a zaś grup alkilowych z łańcucha fos-focukrowego DNA. Wykazano, że ludzki enzym ma duże regiony o podobnej sekwencji aminokwasowej do metylotransferaz I i II u E. coli choć podobieństwo nukleotydowe jest niewielkie.

Fotodimery pirymidyn, naprawiane przez system zwany fotoreaktywacją. Promieniowanie ultrafioletowe powoduje powstawanie dimerów pirymidynowych, reszty pirymidynowe sąsiadujące w jednej nici zostają połączone w iązaniami kow alencyjnymi (ryc. 8.2). Takie zmiany pow odują zatrzymanie replikacji i ekspresji genów do czasu usunięcia uszkodzenia. Naprawa zachodzi przy udziale jednego enzymu fotoliazy, przywrócenie pierwotnej struktury odbywa się bez usuwania napraw ianej zasady. Fotoliaza to monomeryczny polipeptyd (54 kDa), kodowany przez gen phr, jego wiązanie się z dimereni nie wymaga światła. Po związaniu z uszkodzoną nicią DNA uzyskuje zdolność absorpcji światła w( zakresie bliskiego nadfioletu i światła niebieskiego (długość fali 300-500 nm). Pochłaniany foton w obecności 2 kofaktorów' (FAD i metylotetrahydrofolianu)

(ilmoi cyklobutyłowy

/


uszkodzona zasada

przyłącza się fotoliaz;

naprawa dimeru i odłączenie fotoliazy

i.rrrrr l

miojsce AP^^

i ti i i.r

glikozydnzn DNA

MIII 1 ■ 1 1 1 1 1 1

^dnonukleotydowa^luka^

endonukleaza AP

1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1

1

ii ii ti r

polimoraza DNA + ligaza DNA

~rrr"i"T r

Ryc. 8.3. Mechanizm wycinania uszkodzonej zasady


TTTT


l mim iT^t

l

; miii rfTfi mii?

/ absorbcja światła

7

1—

J_lilii

V "TTTf MMMM J

Ryc. 8.2. Fotochemiczna naprawa dimeru w nici DNA

aktywuje fotoliazę, która rozdziela dimer na monomeryczne nukleotydy, a następnie oddysocjowuje od DNA. Ten system naprawy występuje u wielu bakterii oraz w komórkach eukariotycznych, także u niektórych kręgowców (z wyjątkiem człowieka).

8.2. Naprawa pośrednia

Wyżej omówione systemy rozpoznają uszkodzenia DNA spowodowane przez mutageny, identyfikują zasady lub nukleotydy o zmienionej strukturze chemicznej, nie potrafią jednak rozpoznawać źle wstaw ionych nukleotydów podczas replikacji. Poreplikacyjna naprawa uszkodzonego DNA polega na naprawie błędów w nici potomnej. U E. coli istnieje kompleks enzymatyczny, który odróżnia nową nić DNA od matrycy, wycina źle wstawione nukleotydy i zastępuje je komplementarnymi nukleotydami. W czasie replikacji błędy pojawiają się w nowo syntetyzowanej nici, dlatego ważne jest rozpoznanie, która nić DNA uległa uszkodzeniu. Sprawa jest prosta, gdy w nici występują zmodyfikowane nukleotydy (np. dimer pirymidyny), gdy jednak w nowo syntetyzow anej nici wystąpi niekom-plementamy nukleotyd, to jak aparat naprawczy może odróżnić nić rodzicielską (prawidłową) od potomnej (z błędem)?

Znacznikiem wyróżniającym nici DNA jest metylacja zasad. Mianowicie w obrębie sekwencji 5-GATC’-.V metylowane są reszty adeniny, natomiast w' sekwencjach 5-CCA(i(j-.V i 5-(XTGG-3‘ metylacji podlega cytozyna. Nić ro-


Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str1 24 Rozdział 1 11.    Organi
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str1 44 Rozdział 4a) szlak biosyntezy pterydyn
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str1 64 Rozdział 6 mają futerko białe, z wyjątk
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str1 84 Rozdział 7 Ryc. 7.10. Inwersja. Chromos
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str7 96 Rozdział 7 Mutacje losowe u E. coli W p
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str0 22 Rozdział 1 rium tumefaciens łatwo można
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str2 26 Rozdział 2 komórka jajowa (N) oocyt II
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str3 28 Rozdział 2 Forma dorosła. Mucha początk
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str4 30 Rozdział 2 chy nie nadają się do dalszy
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str5 32 Rozdział 2 kompleks HOM (od homeotyczny
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str7 36 Rozdział 3 różne osobniki. Metodą hybry
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str8 38 Rozdział 3 Chromosomy politeniczne są t
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str9 40 Rozdział 3 duplikacji, - translokacji.
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str2 46 Rozdział 4 46 Rozdział 4 / muszka dzika
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str3 48 Rozdział 4 Samice homozygotyczne Bar (B
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str4 50 Rozdział 4 5.    Barwa o
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str6 54 Rozdział 5 h) DNA trawionego RNazą, dos
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str7 56 Rozdział 5 Zdolności transformujące pos
GENETYKA Anna Sadakierska Chudy , Grażyna Dąbrowska str8 58 Rozdział 5 mórkowej. Protoplastyzacja p

więcej podobnych podstron