img241

liczne - średnio 5 komórek z 20 pól widzenia), nie dające wzrostu drobnoustrojów lub tylko nikły ich wzrost w warunkach tlenowych (w posiewach odciskowych i płynnych). Obecność beztlenowych laseczek przetrwalnikują-cych dyskwalifikuje konserwy.

Wykonanie ćwiczenia Mikrobiologiczna ocena konserw rybnych

•    Materiały: konserwy rybne w zalewie olejowej i sosie pomidorowym.

•    Aparatura i szkło: waga, mikroskop zwykły świetlny, moździerz, szkiełka przedmiotowe, jałowe płytki Petriego, jałowe pipety 1 cm³.

•    Sprzęt: ezy, pęsety, skalpele.

•    Odczynniki: alkohol etylowy, fiolet krystaliczny, płyn Lugola, fuksyna fenolowa, piasek morski, kolba Erlenmeyera z 180 cm³ soli fizjologicznej (płynu fizjologicznego), probówki z 9 cm³ soli fizjologicznej.

•    Pożywki: agar odżywczy, agar zwykły, bulion z glukozą, pożywka Wrzoska, agar słupkowy z glukozą.

•    Wykonanie:

1.    Ocena organoleptyczna:

-    obejrzeć zawartość konserwy, zwracając uwagę na konsystencję, zapach, barwę, które powinny być właściwe dla danego asortymentu konserw.

2.    Oznaczanie występowania bakterii tlenowych i beztlenowych:

-    pobór i przygotowanie prób - przetrzeć wieczko puszki watą nasączoną alkoholem etylowym i opalić w płomieniu palnika, wyjałowionym bolcem zrobić otwór o średnicy 15 mm w środku wieczka, pobrać trzy próbki po ok. 1 g mięsa ryby;

-    pobrane próbki przenieść na pożywki: bulion z glukozą, bulion Wrzoska, agar słupkowy z glukozą;

-    inkubować w temp. 37°C przez 48 h;

-    odczyt wyników - o obecności bakterii tlenowych świadczy zmętnienie bulionu z glukozą, o obecności względnych beztlenowców i beztlenowców świadczy zmętnienie pożywki Wrzoska i pojawienie się pianki na powierzchni parafiny, a o obecności bakterii fermentujących glukozę świadczy popękanie słupka agarowego.

3.    Wykonanie preparatu odciskowego barwionego metodą Grama:

-    pobór i przygotowanie prób - przetrzeć wieczko puszki watą nasączoną alkoholem etylowym i opalić płomieniem palnika, usunąć wieczko puszki i jałową pęsetą pobrać kawałek mięsa ryb;

-    na odtłuszczonym szkiełku wykonać odcisk pobranej próbki;

-    preparat wysuszyć w powietrzu i utrwalić w płomieniu palnika;

-    preparat wybarwić metodą Grama (patrz rozdz. 3);

-    odczyt wyników - policzyć komórki bakteryjne w 20 polach widzenia i obliczyć średnią arytmetyczną.

4.    Wykonanie wysiewu odciskowego na agarze odżywczym (na płytkach):

-    pobór próbki jak w pkt 2;

166