Zadania 1 (sposób hamowania)
Dokonano pomiarów kinetyki enzymu jako funkcji stężenia substratu (S), przy braku i w obecności 2 mM inhibitora (li
a) Jakie są wartości Km i Vmł, tego enzymu przy braku i w obecności inhibitora?
b) Jęki jest to rodzaj inhibicji?
c) Jaka jest wartość stałej wiązania tego inhibitora?
d) W warunkach, kiedy (S) = 10 jjM. a [I] = 2 mM, jaki ułamek całkowitej ilości enzymu wiąże się z substratem, a jaki z inhibitorem?
ISJ (pM) |
szybkość (pmoł/mm) | |
bez inhibitora |
z inhibitorem | |
3 |
10,4 |
4,1 |
5 |
14.5 |
6.4 |
10 |
22,5 |
11,3 |
30 |
33,8 |
22,6 |
90 |
40,5 |
33,8 |
/^e^Kiedy [SJ = 30 pM, jaki ułamek cząsteczek enzymu wiąże się z substratem przy braku inhibitora, a jaki w obecności 2 mM inhibitora? Porównaj stosunek uzyskanych wartości ze stosunkiem szybkości reakcji w takich samych warunkach.
Zadanie 2 (inny sposób hamowania)
Dokonano pomiaru kinetyki enzymu, omawianego w zadaniu 1, w obecności innego inhibitora. Stężenie tego
inhibitora wynosiło 100 pM.
a) Jakie są wartości Km i Vmax tego enzymu przy braku i w obecności inhibitora? Porównaj je z wartościami uzyskanymi w zadaniu 1.
b) Jaki jest to rodzaj inhibicji?
c) Jaką wartość ma stała dysocjacji tego inhibitora?
(S](pM) |
szybkość (pmol/min) | |
bez inhibitora |
z inhibitorem | |
3 |
10,4 |
2.1 |
5 |
14,5 |
2,9 |
10 |
22,5 |
4,5 |
30 |
33,8 |
6.8 |
90 |
40,5 |
8.1 |
d) Kiedy [S] = 30 pM, jak ułamek całkowitej ilości enzymu będzie związany z substratem w obecności 100 pM inhibitora i przy jego braku?