kolorymetria biochemia

Oznaczanie stężenia żelaza metodą kolon metry czną

Do 6 probówek dodać kolejno: 0. 1.2, 3.4 i 5 ml roztworu wzorcowego Żelaza o stężeniu 5pg/ml Do ostatniej 2 ml próby badanej. Zawartość wszystkich probówek uzupełnić wodą do 5 ml i dodać 0.5 ml 10% roztworu kwasu sulfosalkylowego oraz 0.5 ml 20% amoniaku. Próby wymieszać i zmierzyć absorbancję przy k= 420 nm.

Lp-	Wzorzec Fe (5pg/ml)	HjO	kwas sulfbsalicylowy i	amoniak	absorbancja próbki (A«a) i
l	0 ml	5 ml	0.5 ml	04 ml	kontrola
2	1 ml	4 ml	04 ml	04 ml
3	2 ml	3 ml	04 ml	04 ml
4	3 ml	2 ml	04 ml	04 ml
5	4 ml	1 ml	04 ml	04 ml
6	5 ml	0 ml	04 ml	04 ml
Próba I badana	2 ml próby badanej	3 ml	04 ml	04 ml

Czcić nhlinraiiiwi:

•    Obliczyć mnożnik w pg/ml i pg/próbę

•    Obliczyć współczynniki kalibracji w p° ml i pg/próbę

•    Wykreślić krzywą wzorcową pg/ml i w pg/próbę

•    Odczytać z krzywych stężenie żelaza w badanej próbie

•    Obliczyć stężenie żelaza w badanej próbie ze średnich wartości współczynnika kalibracji

•    Porównać wyniki obliczone na podstawie współczynniki kalibracji z wynikami odczytanymi z krzywej wzorcowej.

v„ ml	An-t.	mnożnik Pg/ml	mnożnik pg/próbę	/ pg/ml	/ pg/próbę
					—i
					j
wartości średnie
ml	A*	(pg/ml) z ■notaika	ilość Mg próbę z mnożnika	C^(Mg/ml) ilość pc /próbę wyliczone *f wyliczone z/
		z krzywej	C»»M0/próbę z krzywej	- Z | _1_ J