SNC02078

Magdalena Widuch GS 26

Ćwiczenie nr 3

/. Wpływ szybkości mieszania immobilizowanej inwertazy z sacharozą na wydajność reakcji

Immobilizowany enzym z poprzedniego ćwiczenia podzielono na dwie równe części i umieszczono w zlewkach. Do obu dodano równe objętości roztworów sacharozy o stężeniach 0,1 mola i 0,5 mola Inkubowano w łaźni wodnej o temp 37°C z jednoczesnym mieszaniem Po 10, 20 i 30 minutach pobierano próbki z obu zlewek po 0,2 ml. Następnie zmierzono absorbancję po reakcji z odczynnikiem miedziowym i oznaczono stężenie cukrów redukujących.

Po inkubacji przemyto buforem octanowym immobilizowaną inwertazę na sączku i umieszczono ją z powrotem w zlewkach dodając jak poprzednio roztwory sacharozy Inkubowano w tej samej temperaturze przy większej szybkości mieszania Próbki pobrano jak poprzednio i oznaczono zawartość cukrów redukujących.

0,1 M sacharoza:

Obroty	Próbka	Absorbancja	S,
50 cpm	10’	0,67	0,00499
	20’	1,37	0,01005
	30’	1,56	0,01145
100 cpm	10’	0.54	0,004
	20’	0.89	0,00653
	30’	1,29	0,00947

Si = So - ( Sr/2)

Si - stężenie sacharozy po czasie t (mol/1)

So - początkowe stężenie sacharozy (mol/l)

S, - stężenie cukrów redukujących po czasie t (odczyt z krzywej wzorcowej * 5/1000) (moll) Prędkość 50 cpm:

Sio- = 0,1 - 0,002495 = 0,0975mol/l Sm- = 0,1 - 0,005025 = 0,09497 mol/1 Sjo = 0,1 - 0,005725 = 0,09427 mol/1

Prędkość 100 cpm.

Sio- = 0,1- 0,002 = 0,098 mol/1 Sjo- = 0,1- 0,003265 = 0,0967 mol/1 Sjo- = 0,1- 0,004735 = 0,0953 mol/1