Wiązanie azotu przez mikroorganizmy jest tylko jednym z procesów biologicznych, które mają wpływ na obieg azotu i jego dostępność dla roślin. Pozostałymi procesami o charakterze mikrobiologicznym są proteoiiza, amonifikacja, nitryfikacja i denitryfikacja. Azot w substancji organicznej gleby występuje głównie w formie aminowej (białka), a w mniejszych ilościach w połączeniach heterocyklicznych (zasady aminowe kwasów nukleinowych). Uwalnianie azotu z substancji organicznej jest określane jako proteoiiza (dezaminacja), a redukcja N aminowego do N—NHS jako amonifikacja. Schematycznie procesy te mają następujący przebieg:
azot organiczny -> R—NH, -f- C02 + inne produkty + energia R-NHj + H20 -► NHS + ROH + energia
Obydwa procesy są egzoergiczne i uwalniana energia jest wykorzystywana przez przeprowadzające je bakterie heterotroficzne. Bakterie te wymagają związków węglowych jako źródła energii. Według Barbera (1971) większość flory glebowej może uczestniczyć w wymienionych reakcjach uwalniania N. Mineralizacja azotu nie jest zatem praktycznie ograniczana niską liczebnością mikroflory, ale hamują ją czynniki zmniejszające aktywność mikrobiologiczną gleby, jak niska temperatura i brak lub nadmiar wody. Uwalniany w wyniku procesu amonifikacji NHj, w sprzyjających warunkach środowiska i przy dostępie tlenu, ulega łatwo utlenianiu do NOi i NO-.
Nitryfikacją nazywamy biologiczne utlenianie amoniaku do azotanów. Proces ten przebiega w dwóch etapach. Na pierwszym etapie jon amonowy NHi ulega udenieniu do NO*, a na drugim jon azotynowy jest udeniany do NO3. Proces nitryfikacji przeprowadzają bakterie autotroficzne, które wykorzystują związki nieorganiczne jako źródło energii koniecznej do wiązania C02. Wyróżnia się dwie wyspecjalizowane grupy tych bakterii. Nitrosomonas powoduje udenianie NH4 do NO,* a Nitrobakter dalsze udenianie NO* do NO*. Obydwie grupy bakterii są bezwzględnymi denowcami i występują jedynie w środowisku o odpowiedniej zawartości denu. W glebach podmokłych udenianie NHJ ulega dlatego znacznemu ograniczeniu. Bakterie nitry-fikacyjne rozwijają się lepiej przy obojętnym lub lekko kwaśnym odczynie gleby. Jak wynika z danych przedstawionych w tabeli 7.4, przy niskiej wartości pH gleby biologiczne udenianie NHt ulega zahamowaniu {Munk, 1958).
Tabela 7.4. Zależność przebiegu nitryfikacji od pH gleby po dodaniu 20 mg N—NH4 (Munk, 1958)
Okres inkubacji, dni |
mg N—N03 |
na 100 g gleby |
pH 4,4 |
pH 6,0 | |
14 |
1,78 |
8,0 |
21 |
2,30 |
12,0 |
35 |
4,72 |
21,4 |
Wspomniane etapy utleniania NHf do NOi mogą być opisane następującymi reakcjami:
2NH| + 30, -*2HNO, + 2H.O + 2H+
2HNO, + O,-► 2H+ 4- 2NOi
2NHT + 40, -> 2NOi + 4H++ 2HaO
Jak wynika z podsumowania obydwu reakcji, nitryfikacja jest związana z powstawaniem jonów H+ i dlatego proces ten prowadzi do zakwaszenia gleby. Na rysunku 7.2 przedstawiono za Duisbergiem i Buhrerem (1954) zależność pomiędzy utlenianiem NH*, zmianą pH gleby i nagromadzaniem NO i. W okresie inkubacji (14 dni) niemal cała ilość NHj uległa utlenieniu do NOi, przy czym stwierdzono proporcjonalne obniżenie pH gleby. Po początkowych 7 dniach inkubacji wystąpiło największe nagromadzenie NOi. Ilość NOi uległa następnie obniżeniu w wyniku aktywności Nitrobactrra. Na ogół jon NOa nie nagromadza się w glebie, gdyż forma ta ulega łatwo dalszemu utlenianiu biologicznemu. Obydwie wymienione grupy bakterii nitryfikacyjnych działają po kolei, we wzajemnym sprzężeniu. Amoniak ulega zatem szybko utlenianiu do NOi, o ile warunki w środowisku glebowym są sprzyjające dla bakterii nitryfikujących, jak to miało miejsce w doświadczeniu, którego wyniki przedstawiono na rysunku 7.2. Do badań użyto żyznej gleby węglanowej o składzie piasku gliniastego, wykazującej pH 7,8, a inkubacja prowadzona była w warunkach laboratoryjnych przy optymalnej wilgotności i temperaturze. W warunkach polowych szybkość nitryfikacji jest jednak często ograniczona na skutek niskiego pH lub nadmiernej wilgotności gleby. Stwierdza się wówczas nagromadzanie w glebie N—NH4. Nitryfikacja przebiega również powoli w glebach zbyt suchych (Sabey, 1969).
□ Rys. 7.2. Zależność pomiędzy biologicznym utlenieniem NHJ, nagromadzeniem NO, i zmianą odczynu gleby (Duisberg i Buchrer, 1954)
269