270220121310

nd

ftys~ 6. Zależność między stężeniem Hb a wartością ekstynkcji (dla roztworów wzorcowych)

Inne parametry czerwono krwi nkowe (UCV, MCH, MCHC)

• MCV (średnia objętość krwinki) — oblicza się ze wzoru: MCV=(HI*10)/Rbc

Otrzymana wartość wyrażona jest w femtolitrach (1 fi = 10'^1S dm³).

• MCH (średnia masa Hb w krwince) - oblicza się ze wzoru: MCH=Hh/RBc Otrzymana wartość wyrażona jest w pikogramach (1 pg = 10'¹²g).

• MCHC (średnie stężenie Hb w krwince) — oblicza się ze wzanr MCHC=(Hbx100)/Ht. Otrzymana wartość wyrażona jest wg x dm.

Porównaj wartości parametrów czerwonokrwinkowych otrzymane dla badanych ryb: grupy kontrolnej i doświadczalnej z wartościami referencyjnymi dla lego gatunku Porównaj także wartości parametrów czerwonokrwinkowych karpia i człowieka (lab. 4).

Tabela 4. Wartości parametrów czerwonokrwinkowych karpia i człowieka

Ćwiczenie 2. Spektrofotometryczne oznaczanie liczby erytrocytów

Spektrofotometryczna metoda oceny liczebności erytrocytów jest prostsza i mniej czasochłonna niż tradycyjne liczenie w hemocytometrze. Jej użyteczność ogranicza się jednak do ryb zdrowych, u których nie mamy do czynienia ze zmianami objętości erytrocytów (np. w przypadku ich pęcznienia następuje wzrost ekstynkcji nie będący wynikiem zwiększonej liczby komórek, a więc pomiar obarczony jest błędem). Do sporządzenia wiarygodnego wykresu potrzeba co najmniej 40 prób.

Wykonanie oznaczenia:

1.    10 mm³ krwi zmieszaj z 5 cm³ roztworu Pawińskiego.

2.    Zmierz ekstynkcję przy 600 nm wobec H2O dest.

3.    Dla tych samych ryb oblicz RBC w komorze Burkera.

4.    Sporządź wykres zależności między ekstynkcją a liczbą erytrocytów obliczoną w hemocytometrze Burkera dla tej samej próby (rys. 7).

Na podstawie otrzymanego wykresu można w przybliżeniu szacować liczbę erytrocytów u zdrowych ryb tego samego gatunku bez potrzeby liczenia w hemocytometrze.

E

E o

ca

E

Rys. 7. Zależność między ekstynkcją a liczbą erytrocytów

35