DSC00242 (18)

fenoloindofenolu (roztwór wodny o barwie różowofioletowej), który ulega redukcji do bezbarwnego Jeukozwi§zku.

Należy pamiętać, że metoda, ta pozwala oznaczyć jedynie zawartość kwasu L-askorbinowego - głównej, lecz nie jedynej czynnej formy witaminy C.

[.    ■ . j/: .    |

1. Przygotowanie odczynnika 2,6-dichlorofenoloindofenolu

W kolbie stożkowej o pojemności 1 dm³ rozpuścić około 600 cm³ gorącej wody destylowanej 0,210 g NaHC0₃ i po nieznacznym ^schłodzeniu dodać 0,25 g 2,6-dichlorofenoloindofenolu. Po ostudzeniu roztwór wymieszać i przenieść ilościowo do kolby miarowej o pojemności 1 dm³, uzupełnić wodą destylowaną do kreski i pozostawić w ciemnym miejscu na 24 godziny. Następnie wymieszać i przesączyć do butli z ciemnego szkła.

2. Ustalenie miana roztworu 2,6-dichlorofenoloind9fenolu

. -Jn,. -

Do kolbki stożkowej o pojemności 100 cm³jznej lyć 100 mg KI i następnie dodać 5 cm³1 mol/l H₂S0₄, a po rozpęferyśtyniu się KI dodać 10 cm³ barwnika. Kolbkę zamknąć i odstawić yia niebie miejsce na 10 minut. Wydzielony jod odmiareczkowujemy ||||||mol/l roztworem tiosiarczanu sodowego wobec 1 cm³1% roztworu skrobi. W identyczny sposób należy wykonać próbę odczynnikową używając wody destylowanej zamiast barwnika.

I ^ Miano roztworu obliczyć względem kwasu L-askorbinowego ze wzoru:

(V - V₀) n

M = 88--—

V,

gdzie:

V - objętość Na₂S₂0₃ zużyta na miareczkowanie barwnika,

V₀ - objętość Na₂S₂0₃ zużyta w próbie odczynnikowej,

V, - objętość .roztworu barwnika, 'b n - miano Na₂S₂Oj. /K | I \

3. Oznaczanie witaminy C w produktach żywnościowych

Odczynniki

2% roztwór kwasu szczawiowego

roztwór mianowany 2,6-dichlorofenoloindofenolu

Wykonanie

W zlewce o pojemności 100 cm³ odważyć 10 g produktu (±0,0001 g), dodać 50 cm³ 2% kwasu szczawiowego. Przenieść ilościowo do kolby miarowej o pojemności 100 cm³. Zawartość kolby uzupełnić do kreski 2% roztworem kwasu szczawiowego. Wymieszać i pobrać do kolby stożkowej 10 cm³ wyciągu i miareczkować 2,6-dichlorofenoloindo-fenolem do wystąpienia lekkiego zabarwienia utrzymującego się 30 sekund. Miareczkowanie powtórzyć trzykrotnie i obliczyć średnią arytmetyczną z ilości zużytego barwnika.

W identyczny sposób należy wykonać próbę odczynnikową używając wody destylowanej i 2% kwasu szczawiowego zamiast produktu spożywczego.

Uwaga ! Jeżeli oznacza się zawartość witaminy C w produktach stałych, to należy je rozdrobnić, a próbkę odważoną rozcierać w moździerzu z 2% roztworem kwasu szczawiowego. Po przeniesieniu ilościowym zawartości moździerza do kolby miarowej pozostawia się ją w ciemnym miejscu na 30 minut, po czym postępuje jak wyżej.

Zawartość witaminy jako kwasu L-askorbinowego (x) wyrażoną w mg/IOOg produktu [mg%] obliczyć według wzoru:

V • V₀ • M -100 V,-a

gdzie:

V - objętość odczynnika Tillmansa zużyta do miareczkowania, V₀ - objętość całkowita sporządzonego wyciągu,

V, - objętość wyciągu wzięta do miareczkowania,

M - miano odczynnika Tillmansa, a — naważka produktu. j n