28659

-    wpływ na istniejące już kanały (dotychczas zamknięte)

-    otwiera się megakanał

-    udeka Ca' i cytochrom C i HjO oraz inne czynniki aktywujące kaspazy

-    proteoliza różnych składników komórid (białek cytoplazmy i jądra) np. poiimerazy

bd-2 (xe) hamuje wejście komórki w apoptozę

Apoptozę mogą wywołać:

zmiany w DNA. tp53

•    napromieniowanie, toksyny, wolne rodniki - otoczenie bez hormonów i czynników wzrośli

czynniki działające na receptory bezpośrednio w błonie komórkowej cyt otok syczno limfocyty T

•    wydzielają perloryny. powstają kanały w błonie, tędy gran enzym, aktywator kaspaz

Wykrywanie:

cytometr przepływowy

•    badanie natężenia luorescencji (wzbudzanie laserem)

•    szybkość bardzo duża (10 tys. kom/s) laserowy cytometr skaningowy

•    komórki na szkiefcu podstawowym

Barwniki:

-    Rh 123 (rhodamina)

•    akumulujc się w mitochondnum    (zależy od potencjału: rpot. = tRh)

•    intensywne świecenie

•    apoptoza .poL = iRh = i świecenie

JC1

•    akumulujc się w mitochondnum    (normalnie zielony)

•    agregacja - pomarańczowy

•    apoptoza: nie agreguje, zielony

-    DiOC,(3)

•    apoptoza mniejsza akumulacja

•    komórki .póżnoapoptofyczne* akumulują go więcej (pomarańczowy)

Badanie zawartości DNA w komórkach: histogram

Wapotozie endanukleazy, świeżo potięle DNA wypłukiwane, mniej DNA.

Ulata asymerii fosfolipidów:

losfatydyioseryna nomialnie tylko w błonie we wnętrz nej w apoptozie na zcvwiąlz

-    substancje wykazujące powinowactwo do fosłatydyloseryny to np. anepsyna anepsyna to fluoresceina: zielone świecenie

Fragmentacja DNA:

ołigonekluazy

na żelu charakterystyczny obraz drabiny (w martwicy przypadkowa fragmentacja) BrdUTP przyłącza się do fragmentów (tam. gdzie pęknięcia)

■» przeawciała ♦ tluorescencja - wdać

Czasami zdarzają się fałszywe komórki apoptotyczne: monocyty fagocytujące ciaka apopłotyczne