Do 20 g mózgu doda/ 100 mL acetonu i dokładnie zhomogenizować. Zawiesin” odsączyć na lejku Buchnera. Stałą pozostałość ponownie zawiesić w 50 mL acetonu i odsączyć jak poprzednio. Z połączonych roztworów acetonowych usunąć rozpuszczalnik pod obniżonym ciśnieniem. Zagęszczony roztwór przesączyć. Surowy cholesterol rozpuścić w minimalnej objętości gorącego etanolu i jeśli zawiera jakieś nierozp zaniecz odsączyć na gorąco. Otrzymany
roztwór cholesterolu w etanolu pozostawić do krystalizacji. Wykrystalizowany cholesterol odsączyć pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostawić w temperaturze pokojowej do wyschnięcia. Osad zważyć i obliczyć zawartość cholesterolu w tkance.
Analiza jakościowa cholesterolu Pod wpływem stęż H2S04 następuje odłączenie od cholesterolu cząsteczla wody i powstaje kwas disulfonowy bicholestadienu (odczyn Salkowskiego). natomiast wr obecności kwasu siarkowego i bezwodnika kwasu octowego tworzy się kwas monosulfonowy bicholestadienu (odczyn Liebemiana-Burcharda).l. Stęż H2S04 2. Bezw'odnik kw.octowego3. Clilorofonnowy roztwór cholesterolu Wykonanie doświadczenia
a) Odczy n Salkowskiego W suchej probówce umieścić 1 mL clilorofonnowego roztwoni cholesterolu i podwurstwić stęż kw/siarkowym. Warstwa clilorofonnowa barwi się na kolor malinowy, natomiast dolna warstwa wykazuje zieloną fluorescencję.
b) Odczy n Uebermana-BnrchardaW suchej probówce umieścić 1-2 mL cliiorofonnowego roztwoni cholesterolu, dodać 5-6 kropli bezwodnika kwasu octowego i 2 kr ople stęż kw siarkowego. Pojawia się czerwone zabarwienie, które szybko przechodzi w barwę zieloną.
Steroidy (sterydy) - organiczne związki chemiczne, lipidy, których w'spólną cechą jest występowanie w ich cząsteczkach szkieletu węglowego wr fonnie czterech sprzężonych pierścieni, czyli sterami (cyklopentanopei hydro fe nantr enu).
grupy steroidów w zol od funkcji i zastos: sterole (np. cholesterol) - obecne we krwi i błonach komórkowych ; hormony płciowa - stenijące zachowaniami seksualnymi; kortykosteroidy - sterujące metabolizmem, równowagą elektrolityczną. sterydy anaboliczne - gnipa stery dów, mających zdolność sterowania anabolizmem organizmu i wykorzystywanych wr dopingu .
steroidy - cząsteczki, których stniktury oparte są na czteropierścieniowym układzie cyklicznym.U czł większość steroidów' spełnia fun.hormonów, chem przenośników sygnałów regulac organizmie. Wśród steroli - naturalnych alkoholi wf grupie steroidów'-cholesterol, który jest ważnym prekursorem syntezy hormonów sterydowych kwasów żółciowych i witaminy D.Z fosfolipidami uczestniczy w tworzeniu błon biologicznych komórek zwierzęcych i roślinnych. W osoczu krwi cholesterol występuje jako składnik lipoprotein