109408

3	3	0	0,5	1
4	3	0	0,5	1

Obserwacje:

W probówce 1 roztwór przyjął rdzawo-brązowy kolor. W probówce 2 i 3 roztwór przyjął barwę szarą, w 4 kolor jasnobrązowy. Roztwory w 1, 2 i 3 probówce były mocno spienione i klarowne, natomiast w 4 mniej spieniony i przejrzysty.

Wnioski:

W probówce nr 3 reakcja nie zaszła, ponieważ wcześniejsze podgrzanie spowodowało dezaktywację oksydazy. W probówce 2 reakcja również nie zaszła, ponieważ nie było w niej pirokatechiny, która stanowi substrat reakcji. Wyciąg z ziemniaka zawiera ugrupowania polifenolowe, która uaktywnia się w wyniku połączenia z substratem. Pozytywny wynik dały próby nr 1 i 4 co świadczy o obecności oksydaza polifenolowej w wyciągu z ziemniaka. Różnica w kolorach wynika z różnicy szybkości utleniania, które zaszło szybciej w probówkach 1, 2 i 3 niż probówce 4 ze względu na ograniczenie tlenu. Próby 2 i 3 zostały wykonane w celu wykrycia wpływu wysokiej temperatury na aktywność enzymu i ustalenia substratu reakcji.

Zadanie 2. Próba benzydynowa.

Wstęp teoretyczny:

Próba benzydynowa jest to próba służąca do wykrywania enzymu peroksydazy, która jest katalizatorem utleniania nadtlenkiem wodoru różnych substratów, tu odczynnika benzydynowego, który pod działaniem utleniaczy daje błękitny wielocząsteczkowy produkt o złożonej budowie. W obecności peroksydaz utlenianie przebiega bardzo szybko.

Przebieg doświadczenia:

Do dwóch probówek dodano ok. 1 ml wyciągu z ziemniaka. Jedną z nich ogrzano w łaźni wodnej (temperatura 100°C) i następnie ochłodzono do temperatury pokojowej. Do obu probówek dodano ok. 1 ml świeżo przygotowanego odczynnika benzydynowego.

Obserwacje:

Roztwór wcześniej zagotowany nie zmienił barwy, pozostał ciemnoszary, natomiast wcześniej zagotowany zmienił kolor na ciemnoniebiesko po dodaniu odczynnika benzydynowego.

Wnioski:

W wyciągu z ziemniaka, który nie był wcześniej ogrzany obecny jest enzym peroksydazy. Wysoka temperatura dezaktywowała enzym.

Zadanie 3. B-amvlaza z nasion zbożowych.

Wstęp teoretyczny:

2