101890

Drożdżowe syslemy ekspresyjne 1. Drożdże są dogodnymi systemami, ponieważ:

•    Szybko rosną

•    Osiągają znacznie większą biomasę niż org prokariotyczne (nawet 100 g sin I hodowli)

•    Są zdolne do przeprowadzania modyfikacji posttranslacyjnych niezbędnych do prawidłowego funkcjonowania i białek pochodzących z org wyższych (np N i O-glikozylacji, tworzenia mostków disiarczkowych, dojrzewania proteolitycznego) - sfałdowania odpowiedniego białek

•    Posiadają zdolność do sekrecji białek do podłoża hodowlanego = eliminacja kilku etapów otrzymywania białek rekombinowanych niezbędnych w przypadku produkcji białek w bakteriach np lizy komórek i wieloetapowego oczyszczalna

Przykładowo: u bakterii liza komórek jest łatwiejsza bo np. można do lizy użyć penicyliny, która będzie niszczyć ścianę komórkową bakterii, ale nie będzie wpływała na metabolizm komórki.

Jako pierwsze stosowano systemy drożdżowe S.cerevisiae np do:

•    Przemysłowej produkcji insuliny

•    HBsAg (białko S wirusa zapalenia wątroby typu B)

Niestety S.cerevisiae nie spełnia wymagań nowoczesnych biotach, gdyż:

•    Ma niski poziom produkcji i sekrecji białek

•    B rak jest stabilności plazmidów rekombinantowych

•    Często następuje hiperglikozylacja hetero logicznych polipeptydów

•    Tylko nieliczne substraty są wykorzystywane jako źródło węgla i energii

Inne drożdżowe systemy ekspresyjne oparte są na:

•    Scluzosaccharomyces pombe

•    Pichia pastoris

•    Pichia methanolica

•    Hansenula polymorpha

•    Yrrowia lipolytica

Najczęściej wykorzystywane na skałę przemysłową:

•    Pichia pastoris

•    Hansenula polymorpha

Wysoka wydajność zewnątrzkomórkowej produkcji białek heterołogicznych (10 gl pożywki) S.cerevisiae:

•    Rekombinanty są najczęściej wykoizystywane do produkcji metabolitów niebiałkowych

•    np etanolu z niekonwencjonalnych źródeł węgla np laktozy zawartej w serwatce.