1148442492

MIKR )©TES1

Tabela różnicująca

■ | d |    - | Klebsieaa o»yloca

- -

32=z:G

=pq=j

aż

□ w.

1 - i - i - i -1 -1 * I

jb opóźnioną reakcję na LYS lut

Ćwiczenie 6. Wykorzystanie testu IMViC do identyfikacji rodzajowej szczepów z rodziny Enterobacteriaceae

I- wytwarzanie indolu - woda peptonowa z tryptofanem - badanie zdolności bakterii do rozkładu tryptofanu do indolu. Zawarty w podłożu tryptofan za pośrednictwem tryptofanazy przekształcany jest w indol, skatol, amoniak i kwas pirogronowy.

Przed odczytem na powierzchnię podłoża nawarstwić 1-2 krople odczynnika Ehrlicha lub Kovacsa. Powstanie ciemnoczerwonego pierścienia świadczy o rozkładzie tryptofanu.

M - próba MR - za pomocą tej próby określa się określanie typ fermentacji glukozy. Badane szczepy posiewa się na podłoże Clarka i inkubuje w 37°C przez 48-72 godzin. Po tym czasie do hodowli dodaje się kilka kropli czerwieni fenolowej. Hodowle w których bakterie zakwaszają hodowle do pH poniżej 4,5 przyjmują barwę czerwoną - wynik (+). Jeżeli hodowla ma pH wyższe niż 4,5 hodowla ma kolor żółty - wynik (-)

V- próba VP (Vogesa-Proskauera) - określanie typu fermentacji glukozy. Kwas pirogronowy powstający w komórkach bakterii w wyniku rozkładu glukozy może być przekształcony m.in. w acetoninę. Ta pod wpływem ługu, dostępie tlenu utlenia się do di acetylu, a związek ten w obecności a-naftolu daje karminowe zabarwienie. Badane szczepy posiewa się na podłoże Clarka i inkubuje w 37°C przez 48-72 godzin. Po tym czasie do hodowli dodaje się 0,5 ml 40% KOH i 0,2 ml 6% alkoholowego roztworu a-naftolu i odstawia na 15 minut. Powstanie karminowego zabarwienia świadczy o obecności acetoniny