2906542897

(11] CYKL NUKLEOTYDOW PURYNOWYCH 179

nych preparatów. Dopiero niedawno udało się uzyskać preparat liazy adenylobursztynianowej z erytrocytów ludzkich oczyszczony 10 000 razy i stabilny podczas przechowywania przez 6 miesięcy w temperaturze 2°C w buforze zawierającym glicerol (44). Właściwości enzymów z drożdży i Neurospora crassa zostały opisane przez S. R a t n e r (47).

Najwyższą aktywność liazy adenylobursztynianowej obserwowano w mięśniach szkieletowych. Przyjmując aktywność w mięśniach szkieletowych za 100% — aktywność w mięśniu sercowym, wątrobie i mózgu wynosi 20—40%, a w erytrocytach 6% (44). Specyficzność enzymu w stosunku do adenylobursztynianu i rybonukleotydu 4-N-sukcynylokarbo-ksyamido-5-aminoimidazolowego jest dość znaczna. Prócz wyżej wymienionych substratów rozkłada on także — jakkolwiek wolniej — 2-dez-oksyadenylobursztynian i P-D-arabinozyloadenylobursztynian (48), natomiast nie rozszczepia sukcynyloadeniny i sukcynyloadenozyny (44). Reakcja katalizowana przez liazę adenylobursztynianową jest odwracalna; stała równowagi dla enzymu z drożdży w temp. 35°C, w pH 7,0 wynosi (39):

[Fumaran] [AMP] [Adenylobursztynian]

8 x 10~³ mola/1

Optimum pH obu reakcji katalizowanych przez tę liazę wynosi 7,6— 7,9 w buforze N-Tris (hydroksymetylo)metyloglicynowym i w buforze Tris/HCl (44). W tabeli 3 zestawiono wartości K_m obu substratów i Ki niektórych inhibitorów tego enzymu. Jak wynika z tych danych powinowactwo enzymu do adenylobursztynianu i rybonukleotydu 4-N-sukcyny-

Tabela 3

Stałe kinetyczne liazy adenylobursztanianowej z erytrocytów człowieka (44)

Substancja	K* x )0-^sM	K*x 10-^5M
Adenylobursztynian Rybonukleotyd 4-N-sukcynylokar-	0,23	—
boksyamido-5-aminoimidazolowy Rybonukleotyd 4-karboksy-5-amino-	0,35	-—
imidazolowy	—	1,0 kompet.
5-AMP	—	0,6 kompet.
Fumaran	—	16,0 niekompet.
Sukcynyloadenina	—	2,7 kompet.
HPO4-	-	48,0 kompet.
Rybozo-5-fosforan		300,0 kompet.
Asparaginian	—	200,0 kompet.
Cytrynian	—	1000,0 kompet.
Ryboza	—	nie hamuje 1

* Wartość pozorna.

Pomiary przeprowadzano w 0,05 M buforze N-Tris (hydroksymetylo)metyloglicynowym o pH 7.8 w temperaturze 37°C.

5*