2906542905

[13]

CYKL NUKLEOTYD0W PURYNOWYCH

181

Czas (mm.)

Ryc. 3. Przebieg in vitro cyklu nukleotydów purynowych przy udziale enzymów z mięśni szkieletowych szczura (18).

A.    Przekształcenie IMP w adenylobursztynian i w AMP.

B.    Dezaminacja AMP.

Mieszanina inkubacyjna zawierała: 0.52 mM IMP; 0.3 mM GTP; 4 mM asparaginian; 27 mM bufor imidazol-HCl pH 6,7; 8,3 mM MgCl*; 1,67 mM fosfokreatynę; 1,2 J/ml heksokinazy drożdżowej oraz ekstrakt mięśniowy w ilości odpowiadającej 1 mg białka na mililitr. Reakcję rozpoczynało dodanie białka z którym wprowadzano do mieszaniny inkubacyjnej: ortofosforan 2,5 mM; KC1 47 mM; EDTA 0,83 mM; ditiotreitol 17 jiM. Inkubację prowadzono w 31°C. Dezaminację AMP rozpoczynało dodanie 2-dezoksyglukozy o stężeniu końcowym 1,67 mM.

Przebieg reakcji monitorowano spektrofotometrycznie.

cyjnej. Wskazuje to, że katalityczne ilości nukleotydów adeninowych, adenylobursztynianu i IMP wystarczą dla prawidłowego przebiegu amo-niogenezy z asparaginianu.

W zjawiskach dających się obserwować in vitro w doświadczeniach przedstawionych na rycinach 3 i 4 dopatrzyć się można pewnych analogii ze stanami fizjologicznymi spoczynku i znużenia mięśni szkieletowych. Pierwsza faza cyklu polegająca na reaminacji IMP do AMP ustaje po wykorzystaniu zasobów fosfokreatyny. Nukleotydy adeninowe zostają wówczas niejako „zablokowane” w formie ATP, co odpowiada sytuacji w mięśniu szkieletowym pozostającym w spoczynku. Rozkładowi ATP