516 M. DROBA I IN. [6]
Tabela 1
Wpływ antysurowic przeciwko polipeptydom izolowanym z układu lamellarnego Antirrhinum majus na reakcje fosforylacji w chloroplastach Nicotiana tabacum (21).
1 Anty surowica przeciwko polipetydowi o masie cząsteczkowej |
«M AT32P/mg chlorofilu/godz | ||
fosforylacja niecykliczna H20—K3(FeCN)a |
fosforylacja niecykliczna H20-MV |
fosforylacja cykliczna zależna od PMS | |
66 000 |
48,1 |
8,8 |
477 |
Surowica kontrolna |
43,1 |
11,3 |
515 |
% zahamowania |
0 |
22 |
7 |
16 |
4,4 |
24,3 | |
' Surowica kontrolna |
47 |
12,5 |
187 |
| % zahamowania |
66 |
65 |
87 |
33 000 |
47 |
14,8 |
156 |
Surowica kontrola |
47 |
12,6 |
222 |
% zahamowania |
0 |
0 |
30 |
24 000 |
47,3 |
9,0 |
331 |
Surowica kontrolna |
49 |
8,8 |
0 |
% zahamowania |
3 |
0 |
0 |
Kontrola bez dodania suro- | |||
wicy |
31 |
10,3 |
395 |
pewne światło na podobieństwa i różnice w strukturze pokrewnych związków pochodzących z różnych źródeł.
Wykazano również (29, 30), że przeciwciała otrzymane przeciwko fer-redoksynie hamowały redukcję NADP+ i fosforylację cykliczną, co może wskazywać na reagowanie przeciwciał zarówno z wolną ferredoksyną, łatwo wypłukiwaną w czasie izolowania chloroplastów, jak również ze związaną z błonami. Z drugiej strony jednak zaobserwowano, że silniejsze hamowanie enzymatycznej redukcji cytochromu c przez NADPH można osiągnąć w układach enzymatycznych in vitro w porównaniu z preparatem chloroplastów. Fakt ten może z kolei sugerować, że związana ferredoksyną jest niedostępna dla przeciwciał.
Zastosowanie metod immunologicznych przyczyniło się także do poznania rozmieszczenia reduktazy ferredoksyną : NADP+ w lamellach chloroplastów. Wiadomo, że enzym ten ulega łatwo wypłukaniu z tylakoidów i dlatego niektórzy badacze uważali, że znajduje się on we frakcji rozpuszczalnej. Początkowo nie udawało się stwierdzić obecności tego enzymu na powierzchni lamelli; po wprowadzeniu specyficznych przeciwciał do zawiesiny chloroplastów lub fragmentów tylakoidów nie tworzyły się precypita-ty. Dopiero zastosowanie testu podwójnych przeciwciał (aglutynacja pośrednia) i mieszanej antygenowo aglutynacji (Ryc. 3) pozwoliło na wykaza-