7334803300

wysiew po 0,1 ml z probówek 10‘³ i 10"⁴ na dwie płytki z agarem odżywczym

Rys. 2. Schemat rozcieńczania hodowli bakteryjnej.

4. Izolowanie mikroorganizmów z gleby i określanie ich liczby

a)    Przygotować roztwór glebowy. W tym celu odważyć 10 g gleby i wsypać do kolby zawierającej 90 ml soli fizjologicznej i całość wytrząsać kilka minut w celu wymycia mikroorganizmów z cząstek gleby. Poczekać, aż cząstki stałe opadną na dno. Taki roztwór glebowy traktujemy jako rozcieńczenie 10"¹ (przygotowane przez prowadzącego zajęcia).

b)    Przygotować dwa rozcieńczenia gleby (10‘⁴ i 10'⁵) tak jak w punkcie 3, otrzymując od prowadzącego roztwór glebowy rozcieńczony 10"³. Wysiać na dwie płytki z agarem odżywczym po 0,1 ml każdego z rozcieńczeń 10^-4 i 10'⁵.

c)    Po kilkudniowej inkubacji w temperaturze pokojowej zaobserwować zróżnicowaną morfologię kolonii mikroorganizmów.

d)    Policzyć kolonie, a następnie obliczyć liczbę bakterii w 1 g gleby, stosując wzór z punktu 3d).

e)    Wybrać jedną z wyrosłych kolonii i opisać w zeszycie jej morfologię, uwzględniając:

-    wielkość (średnicę) w mm;

-    typ wzrostu (na powierzchni lub częściowo wrośnięta w podłoże);

-    barwę kolonii i jej otoczenia (barwnik może dyfundować do podłoża);

-    przejrzystość (przejrzysta, nieprzejrzysta, opalizująca);

-    kształt (kolonia może być okrągła z brzegiem o zróżnicowanym wyglądzie; może być rozgałęziona, amebowata, pofałdowana, strzępiasta, nieregularna; p. str. 21);

-    brzeg kolonii (gładki, falisty, płatkowaty, ząbkowany, nitkowaty);

-    wzniesienie (płaska, wypukła, pępkowata, kraterowata, z wałem brzeżnym);

-    powierzchnię (gładka, lśniąca, matowa, pomarszczona, pofałdowana, krzaczkowata, koncentrycznie pierścieniowata);

-    strukturę (ziarnista, włóknista, skórzasta, krucha, ciągnąca się - strukturę bada się za pomocą ezy).

7