TESTY RÓŻNICUJĄCE
Różnicowanie szczepów syntetyzujących enzymy amylolityczne – podłoże agarowe ze skrobią wg Waksmana.
Przebieg doświadczenia:
+ przygotowano ok. 90cm3 r-ru mąki w jałowej wodzie
+ wykonano posiew punktowy igłą na płytkę Petriego z podłożem Waksmana
+ przeniesiono zaczepioną płytkę do inkubacji
+ po inkubacji płytkę zalano płynem Lugola
Obserwacje:
Na płytce wyrosła kolonia grzybów – pleśni. Ponadto cała powierzchnia pożywki zabarwiła się na ciemno –
granatowy kolor, prócz obszaru wokół kolonii pleśni.
Wnioski:
Na płytce nie wyrosły bakterie amylolityczne. Taki wynik świadczy o dużej czystości badanej mąki.
Wyrosły natomiast pleśnie, które rozkładały skrobię – brak zabarwienia w obrębie kolonii. Pleśnie te należą do grzybów rozkładających skrobię na cukry proste.
Różnicowanie szczepów syntetyzujących enzymy proteolityczne.
Przebieg doświadczenia:
+ przygotowano 100cm3 r-ru gleby w jałowej wodzie
+ wykonano posiew punktowy na dwie płytki Petriego (jedna zawierała agar żelatynowy, druga agar mleczny)
+ wysiane płytki inkubowano 7 dni
+ po inkubacji sprawdzono konsystencję podłoża żelatynowego
Sprawdzono czy na płytce z agarem mlecznym wystąpiły przejaśnienia, w celu upewnienia się o braku przejaśnień zalano powierzchnię pożywki nasyconym r-rem (NH4)2SO4.
Obserwacje:
Na płytce z żelatyną wyrosła jedna kolonia, która upłynniła pożywkę. Na płytce z agarem mlecznym nie zaobserwowano przejaśnień.
Wnioski:
Bakterie które wyrosły na żelatynie należą do grupy bakterii proteolitycznych – rozkładających białko. Na płytce z agarem mlecznym nie wyrosły bakterie o zdolności proteolitycznej. W badanej próbce ziemi znajdowało się niewiele bakterii zdolnych do rozłożenia białek.
Różnicowanie bakterii z rodziny Enterobacteriaceae – podłoże Kliglera.
Przebieg doświadczenia:
+ wyjałowioną igłą pobrano materiał z badanej kolonii poprzez dotknięcie jej
+ następnie nakłuto tą igłą część słupkową pożywki
+ po nakłuciu rozprowadzono materiał po części skośnej pożywki
+ inkubowano w temp. 37oC przez 24h
Obserwacje:
Czerwona pożywka po inkubacji zabarwiła się na kolor żółto – brązowy.
Wnioski:
Zabarwienie słupka oraz skosu wskazują na fermentację laktozy i glukozy co świadczy o obecności bakterii z gatunku Escherichia coli.
Różnicowanie bakterii kwaszących – zmodyfikowane podłoże Blickfeldta z CaCO3.
Przebieg doświadczenia:
+wykonano posiew próbki piwa (0,5cm3) na płytkę z podłożem Blickfeldta, o właściwościach kwasowych
+ przeniesiono do inkubacji
+ ocena przejaśnień na powierzchni pożywki
+ wykonano test na obecność katalazy:
na szkiełko podstawowe nakropiono wodę utlenioną, następnie jałową ezą przeniesiono materiał
bakteryjny do kropli wody utlenionej
Obserwacje:
Na szalce wyrosło wiele koloni, które zrosły się ze sobą uniemożliwiając ich dokładne policzenie.
Kontakt materiału bakteryjnego z wodą utlenioną spowodował jej pienienie – powstawanie pęcherzyków gazu.
Wnioski:
W badanym materiale – piwie znajdowało się wiele bakterii kwaszących o czym świadczy olbrzymia ich ilość na płytce z pożywką, uniemożliwiająca ich dokładne policzenie.
Test na obecność katalazy jest pozytywny – K+, co oznacza, że bakterie obecne w piwie wytwarzały katalazę, która rozłożyła wodę utlenioną do wody i tlenu:
2H2O2
2H2O + O2↑
Wobec tego w badanym piwie obecne były bakterie octowe. Obecność właśnie tych bakterii jest oczywista, ponieważ substratem pokarmowym bakterii octowych jest etanol, obecny w piwie.