GPC ?
HPLC cz.2
ver. 1.0
" Chromatografia elowa / sitowa / molekularna (gel permeation
chromatography
" Chromatografia wykluczania wg rozmiarów (size exclusion
chromatography)
" GPC  zasada rozdziału, kalibracja, obliczenia
" Analiza jako ciowa  krok po kroku
Chromatografia = Rozdział + Detekcja
" Analiza ilo ciowa  krok po kroku
" Przygotowanie próbek do analiz chromatograficznych
" Zastosowania HPLC/GPC
" Przykładowy problem do rozwi zania
Schemat zestawu do GPC = HPLC
1 2
Polimery, oligomery &
Mechanizm rozdziału
 Parametry polimerów: Mw, Mn, Pd, RCC
Roztwory polimerów, posta makroła cucha
3 4
Zasady pracy i kalibracja Wyniki
V0  obj to martwa
" Jako ciowe  porównywanie Vr
(pomi dzy ziarnami
" Ilo ciowe  rednie ci ary cz steczkowe: Mw, Mn. Polidyspersja
wypełnienia)  całkowite
polimeru Pd=Mw/Mn. Rozkłady mas czasteczkowych.
wykluczanie  obj to
retencji pierwszego piku
Vi  obj to wewn trzna 
pojemno wszystkich
porów wypełnienia
Vt  obj to całkowita
(Vt=Vo+Vi)  obj to
retencji ostatniego piku
Ve=Vo+Kd�Vi
GPC  metoda wzgl dna
5 6
GPC  HPLC porównanie Analiza jako ciowa
" Mechanizm rozdziału
" Porównanie tR wzorca(ów) z chromatogramem próbki (przy ró nych
" Rodzaj próbek
metodach detekcji  typach detektorów, oraz składzie eluentu)
7 8
Analiza ilo ciowa Analiza ilo ciowa
" Wzorca zewn trznego (metoda krzywej kalibracji)
Zało enie (do sprawdzenia!): ilo substancji (st enie) jest
proporcjonalne do powierzchni (wysoko ci) piku odpowiedni zakres
st e (szum/nieliniowo detektora/pojemno kolumny)
Metody analizy ilo ciowej:
" Wzorca zewn trznego (metoda krzywej kalibracji)
" Wzorca wewn trznego
" Dodatku wzorca
" Normalizacji wewn trznej
9 10
Analiza ilo ciowa Analiza ilo ciowa
" Wzorca wewn trznego " Metoda normalizacji wewn trznej
11 12
Zako czenie
" Zastosowanie HPLC (analityczne, preparatywne)
" O przygotowywaniu próbek do HPLC
" Problemy:
" Detektor dla układu HPLC do oznaczania cukrów
" Detektor dla układu HPLC do oznaczania zwi zków
aromatycznych
" Jak analizowa mieszanin zawieraj c bardzo małe ilo ci
analitu
13