Podstawowe techniki histologiczne:
1. mikroskopia świetlna jasnego pola:
- trwałe, barwnione preparaty histologiczne,
- barwne reakcje histochemiczne lokalizujące
w wyspecjalizowanych komórkach:
a) związki organiczne (cukrowce,
tłuszczowce, aktywne enzymy),
b) gromadzone związki mineralne,
2. mikroskopia świetlna kontrastowo-
fazowa.
3. mikroskopia świetlna fluorescencyjna.
4. mikroskopia elektronowa transmisyjna i
skaningowa.
5. techniki specjalne:
autoradiografia,
hodowle komórek i tkanek.
Podstawowe techniki histologiczne:
1. przygotowanie trwałego preparatu do
obserwacji komórek i tkanek w mikroskopie
świetlnym.
Utrwalacze złożone formalinowe:
Mieszaniny dobrze utrwalające struktury
1. Płyn Bouin
komórkowe:
15 ml nasyc. roztworu wodnego kwasu
pikrynowego
5 ml formaliny (40% formaldehyd)
1 ml kwasu octowego lodowatego.
2. Płyn Bakera (Fo-Ca)
10 ml 10% chlorku sodu
10 ml formaliny
80 ml woda destylowana.
Utrwalacze złożone nie zawierające formaliny:
1. Płyn Flemminga
15 ml 1% kwasu chromowego,
4 ml 2% czterotlenku osmu
1 ml kwasu octowego lodowatego.
Bardzo dobrze utrwala krwinki, organele (mitochondria),
ziarnistości cytoplazmatyczne.
Mikrotom
Bloczek z zatopionym materiałem tkankowym
Mięśnie poprzecznie prążkowane ssaka
Komórki nerwowe piramidalne z kory mózgowej człowieka
Przekrój przez osteony kości zbitej ssaka
" 2. Reakcja histochemiczna PAS
" Reakcja PAS ujawnia w preparatach tkankowych grupy
aldehydowe wielocukrowców na drodze reakcji barwnej z
kwasem fuksynosiarkowym obecnym w odczynniku Schiffa
(zabarwienie czerwone). W reakcji wykorzystuje się hydrolizę
węglowodanów kwasem nadjodowym przekształcającej grupy
1,2 glikolowe cukrowców w grupy aldehydowe. Kwas
nadjodowy zatrzymuje reakcję utleniania na etapie powstania
aldehydów i dalsze utlenianie nie prowadzi do powstania grup
karboksylowych.
3. Autoradiografia
Metoda autoradiograficzna wykorzystuje substraty
metaboliczne znakowane nuklidami promieniotwórczym
W badaniach biologicznych wykorzystuje się emitery � o
niskim poziomie
energii. W badaniach cyklu komórkowego
(np. wykrywanie poliploidalności komórek)
stosuje się jako prekursor jądrowy tymidynę
znakowaną trytem H-3.