DSC249

%

'XX

%c

'te

tm

%,

^rKv,,

%

v/

Z

Metody spektrofotometryczne w badaniu właściwości piy.celwutlotilnjiicych żywności

Oznaczenie aktywności przcciwutlcnlnjącoj melodii redukcji rodnika DPPH Zasada metody:

Właściwości przeciwrodnikowe badanych naparów należy oznaczyć testem z zastosowaniem rodnika DPPH (2,2-difenylo-1 -pikrylhydrazy 1). Metoda tu pozwala na określenie stopnia wygaszania rodnika DPPH w określonym czasie, zainicjowanego w obecności przeciwutleniacza. Rodnik 2,2-difenylo-1-pikrylhydrnzylowy jest stabilny, wykazuje maksimum absorpcji przy długości fali X, ■ 515 nm. W obecności przeciwutleniacza ulega on redukcji, którą charakteryzuje zmiana barwy alkoholowego roztworu DPPH' z fioletowej na żółtą. Im silniejsze są właściwości przeciwutleniające danej próbki, tym zmniejszenie absorbancji odzwierciedlające redukcję rodnika DPPH jest większe. Próbki o mniejszej zdolności dezaktywacji wolnego rodnika wykazują niewielki spadek absorbancji.

Odczynniki chemiczne:

-    DPPH (2,2-difenylo-1-pikrylhydrazyl; alkoholowy roztwór).

Do fiolki (o pojemności 20 cm³) pobrać 9 cm³ metanolu następnie dodać 3 cm³ przygotowanego 0,5 M roztworu DPPH.

-    Metanol (alkohol metylowy).

Przygotowanie naparów herbat;

Zalać I g badanego materiału 100 cm³ wody destylowanej (temp. 90°C). Po upływie 8 min przesączyć napar przez sączek i schłodzić do temp. pokojowej.

' onanie oznaczenia:

A0 - 2 cm³ metanolu i 1,5 cm³ przygotowanego roztworu DPPH.

A - próba badana - 2 cm³ badanego naparu i 1,5 cm³ przygotowanego roztworu DPPH. Ponuar absorbancji wykonać przy długości fali X“515 nm po 30 min od zainicjowania reakcji Pomiar wykonać w dwóch powtórzeniach.

Kalibracja - kalibrację spektrofotometru przeprowadzić używając metanolu.