wodą do kreski. Do sześciu kolb o pojemności 25 cm3 odpipetować kolejno: 0,0; 2,0; 4,0; 6,0; 8,0; 10,0 cm3 przygotowanego roztworu kwasu sorbowego i następnie uzupełnić do objętości 10 cm3 dodając kolejno: 10,0; 8,0; 6,0; 4,0; 2,0; 0,0 cm3 wody. Otrzymane w ten sposób roztwory zawierają odpowiednio 0,0; 0,4; 0,8; 1,2; 1,6; 2,0 mg kwasu sorbowego w 1 000 cm3. Z przygotowanymi roztworami postępować jak z próbą właściwą. Po wykonaniu pomiarów wykreślić krzywą wzorcową, odkładając na osi rzędnych wartości absorbancji, a na osi odciętych stężenie kwasu sorbowego w mg/1 000 cm3.
Obliczenie wyniku: końcowy wynik w mg na 1 kg produktu obliczyć, korzystając ze wzoru:
gdzie:
n - stężenie kwasu sorbowego odczytane z krzywej wzorcowej (mg/1 000 cm3], V! - objętość, do której rozcieńczono destylat (250 cm3),
V2 - objętość destylatu pobrana do oznaczenia (10, 5 lub 2 cm3),
V3 - objętość, do której rozcieńczono destylat pobrana do oznaczenia (10 cm3),
m - masa naważki próbki [g].
3. Oznaczanie zawartości azotanów(V) i azotanów(lll) metodą z chlorowodorkiem 2-etoksy-6,9-diamino-akrydyny (riwanolem)
Odczynniki i aparatura: 25-procentowy roztwór węglanu sodu, 10-procento-wy roztwór siarczanu(VI) kadmu, 0,25 M roztwór wodorotlenku sodu, 10-pro-centowy roztwór kwasu solnego, 0,1-procentowy roztwór chlorowodorku 2-eto-ksy-6,9-diamino-akrydyny (riwanolu), 0,01-procentowy roztwór azotanu(III) sodu, spektrofotometr
Wykonanie oznaczenia: rozdrobnioną średnią próbkę laboratoryjną mięsa lub przetworów mięsnych zhomogenizować lub po zmieleniu rozetrzeć w moździerzu do uzyskania jednolitej masy. Następnie próbkę o masie 50 g przenieść ilościowo do kolby miarowej o pojemności 500 cm3 i dodać około 300 cm3 wody destylowanej i 6 kropli 25-procentowego roztworu Na2C03. Kolbę pozostawić na 30 min, często mieszając. Po dopełnieniu kolby wodą destylowaną do 500 cm3 i wymieszaniu zawartość sączyć przez karbowany sączek. Następnie do kolby miarowej o pojemności 100 cm3 przenieść 50 cm3 otrzymanego przesączu, dodać kroplami z pipety 5 cm3 10-procentowego roztworu CdS04 (w celu redukcji azotanów(V)), zawartość wymieszać i dodać 5 cm3 0,25 M NaOH, ponownie wymieszać i dopełnić wodą destylowaną do kreski. Kolbę z zawartością silnie wytrząsnąć i odstawić na kilka minut, po czym zawartość jej sączyć. Otrzymany przesącz powinien być bezbarwny i klarowny. 20 cm3 otrzymanego przesączu przenieść do kolby miarowej o pojemności 50 cm3, dodać 0,5 cm3 10-procentowego roztworu HC1 i 5 cm3 0,1-procentowe-go roztworu riwanolu (chlorowodorek 2-etoksy-6,9-diamino-akrydyny), następnie dopełnić wodą destylowaną do kreski i zawartość kolby wymieszać. W tak przygotowanej próbce oznaczyć absorbancję przy długości fali świetlnej X = 580-600 nm.
W celu przygotowania krzywej wzorcowej do kolbek miarowych o pojemności 50 cm3 odmierzyć kolejno według schematu następujące ilości roztworu wzorcowego:
Numer kolbki o poj. 50 cm3 |
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
Liczba 10 mg% NaN02 [cm3] |
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
Stężenie NaN02 [mg%] |
0 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
1,0 |
Następnie do każdej kolbki dodać po 0,5 cm3 10-procentowego roztworu kwasu solnego oraz 5 cm3 0,1-procentowego roztworu riwanolu (chlorowodorek 2-etoksy-6,9-diamino-akrydyny), uzupełnić wodą destylowaną do kreski i wymieszać. W tak przygotowanych próbkach wzorcowych oznaczyć absorbancję wobec próby ślepej nie zawierającej azotanu(III) sodu - próbka nr 0. Obliczenie wyniku: zawartość azotanów(III) odczytać z krzywej wzorcowej wykreślonej w układzie stężenie azotanu(III) sodu - absorbancja.
Końcowy wynik obliczyć w mg azotanu(III) sodu na 100 g produktu, uwzględniając kolejne rozcieńczenia.
209