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PROBLfeMES D'IMMUNOLOGIE 217

Facide trichloracćtique, Gallut & Grabar (I943b) ont eu recours h des tests comparatifs de prócipitation quantitative avec un sćrum obtenu par immu-nisation de lapins avec cette derntere substance (voir Gallut & Grabar, 1943a). D’aprós les rćsultats de ces tests, ces deux chercheurs sont arrivćs k la conclusion suivante: « Au debut de son elaboration la toxine contient un antigfcne glucidopidique complexe qui est ensuite clive pour donner un glucidolipide plus simple (comme celui extrait des vibrion$ eux-memes) et une substance qui ne precipite pas avec les immunserums»,

En poursuivant 1'ćtude de la toxine choleriąue a l'aide de Fultra-filtra-tion, Gallut & Grabar (1945) out confirmć que la toxine etait formee de deux substances differentes — soit, a) un antigene glucidolipidiąue plus simple et b) une substance toxique qui, en raison de sa molecule de petite dimension, passait k travers les ultrafiltres. Les deux chercheurs ont ainsi caracterise les differences existant entre ces deux substances:

Endotoxine

ęłucidolipidiąue

Substance ioxlque dans Vulirafdtrai

Dimensions Naturę chimique

Action des immunserums pr£par6s soit avec la toxine totale, soit avec les com-plexes glucidolipidiąues plus simples Effet pathogene

80-100 m/a    4 mp

glucidolipide probablement proteidique

neutralisee    non neutralisće

congestion    hypothermie

Des dtudes plus detaillees de Grabar & Gallut (1945) sur la fraction hypothermisante de la toxine cholćriąue ont montri qu'il est vrai$emblable, contrairement aux previsions de ces deux chercheurs, que cette substance ne soit pas de naturę proteidiąue, parce qu’elle n'etait pas precipitable par Facide trichlorac£tique ni par le tungstate de sodium. La substance hypothermisante s'est avćree thermolabile et privee de pouvoir antigeniąue (voir aussi Gallut & Grabar, 1947).

Burrows (1944) a utilise les methodes suivantes pour isoler Pendotoxine de V. choterae : a) extraction k froid par Facide trichloracćtiąue M/2, suivie de dialyse contrę la Cellophane de Fextrait neutralisć; b) dćsintógration des vibrions par broyage a grandę vitesse avec du sable, $uivie de centrifugation pour sćparer les debris cellullaires du surnageant opalescent toxique; c) solution dans Furie 6M;Ą digestion par la pepsine pendant 3-5 jours, $uivie de Pćlimination du materiel insoluble par centrifugation; e) extraction des vibrions lyophilisćs par le mćthanol, Pćthanol, le chloroforme ou Fćther ethylique dans un appareil de Soxhlet.

L’addition de 3*5 volumes d'ćthanol a Fextrait trichloracćtiąue fait apparaitre un precipite fioconneux (qui est un polyoside), tandis que la toxine reste en solution, Quand on concentre par evaporation le filtrat de la prćcipitation alcooliąue, une huile jaune se separe qui, contenant la majeure partie de Fendotoxine, a une DLM (dose lćcale minimum) de 0,1 ml pour la souris, et parali 6tre un melange d’alcool et de lipides. Cette substance est