330 femes J. Scientifigues du Rćseau Biotechnologies Wgćtales AUPELF.UREF, Orsay, juillet 1997
developpement et cause occasionnellement des pertes dans les pays developpes. En Afrique du Nord, le deficit hydrique est considere comme etant la contrainte climatique la plus importante. En effet, la production de plus de 75 % des 94 millions d'hectares cultives est tributaire essentiellement des precipitations, faibles et irregulieres. Parmi les plantes cultivees pour Talimentation de 1'homme, le ble occupe actuellement la premiere place en ce qui conceme les surfaces cultivees, et la deuxieme, apres le riz, pour la quantite d'energie qu'il procure. Plus de 90 % des surfaces productrices du ble dur dans le monde sont localisees en Mediterranee. Les conditions de culture y sont ideales pour la production de grains de haute qualite qui sont utilises dans de multiples produits constituant la base de Talimentation en bassin mćditerraneen. Au Maroc, le ble dur entre dans la preparation du pain principalement, mais aussi du couscous, des pates alimentaires et d'autres produits traditionnels (Harcha, Crepes, Bouillies, etc.). L'amelioration de la productivite du ble dur par la creation de nouvelles varietes plus performantes et plus resistantes a la secheresse est donc essentielle. La variation somaclonale liee a la culture in vitro constitue en ce domaine un outil novateur, d'autant plus interessant pour Tameliorateur qu’elle srapplique a un grand nombre de cellules et surtout, qu'elle intendent concomitamment a 1'application de pressions selectives qui peuvent trier. voire meme orienter les variations. L'objectif de notre travail est Tamelioration de la resistance a la secheresse chez le ble dur (Triticum durunt Desf.) en utilisant la variation somaclonale, associće a la selection in vitro , comme source de variation genetique. Trois varietes (Selbera, Sebou et Kyperounda), presentant la meilleure aptitude a la culture in vitroy ont ete retenues pour la sćlection. Trois methodes de selection ont ete appliquees aux cals en presence de polyethylene glycol 10 000 (PEG): (1) une selection de longue duree (6 mois) durant la phase de callogen^se et (2) durant la phase de regeneration (2 mois) en presence de 25 % de PEG, et (3) une selection de courte duree (1 mois) en milieu liquide (35 % de PEG) durant la phase de callogenese. Sur les 30 plantules Ro regenerees a partir des cals survivants, 13 ont montre une amelioration de la resistance par rapport aux varietes d'origine, sur la base de mesures de la fluorescence de la chlorophylle et des pertes d'electrolytes effectuees sur les feuilles soumises a un stress hydrique. L'autofecondation de ces plantes Ro a donnę au total 40 plantes R | dont 18
presentent une amelioration du comportement vis-a-vis du stress. Ensuite, 69 parmi 133 plantes R: ont ete retenues sur base d'une moindre perte d'electrolytes comparees aux varietes de depart. Quatre parametres d'importance capitale pour la resistance a la secheresse ont ete utilises pour la poursuite de la caracterisation et le criblage des lignees aux generations Rj et R4, a savoir la fluorescence de la chlorophylle, la stabilite membranaire, la resistance stomatiąue et la precocite. L'amelioration liee a ces 4 parametres s’est maintenue chez les 2 lignees Sel 36 et Kyp 19 issues respectivement des varietes Selbera et Kyperounda. Des ameliorations de 3, 2 et 1 parametres sont detectees chez 19, 27 et 8 lignees respectivement. Enfin, 2 lignees ne presentent plus d'amelioration par rapport aux varietes de depart. En R_j, Les 2 lignees Sel 36 et Kyp 19 ont ete evaluees, sur base des memes parametres, comparativement aux varićtes parentales. Tous les tests, mis a part celui de la stabilite membranaire, ont revele que leur resistance au stress hydrique est toujours superieure a celle des varietes d'origine.
En conclusion, differentes lignees somaclonales ayant montre une amelioration de la resistance a la sćcheresse ont ete selectionnees. Les mecanismes impliques dans cette amelioration varient d‘une variete sur 1'autre et sont encore detectables a la generation R4. Une application du stress hydrique au niveau de la plante entiere est necessaire pour une etude plus approfondie aux niveaux morphologique, biochimique, physiologique et pheno!ogique.