Wysalanie białek strącanie białek z roztworów poprzez dodanie stężonego roztworu soli. Proces jest wynikiem zaburzenia otoczki solwatacyjnej i agregacji cząsteczek białek w wyniku łatwiejszego kontaktu pomiędzy polarnymi grupami sąsiadujących cząsteczek. Do wysalania stosuje się sole metalu lekkiego (np. KCl) Proces ten jest przejściem zolu w żel, nie narusza struktury białka (także czwarto- i trzeciorzędowej) i jest odwracalny (nie powoduje denaturacji). Reakcja biuretowa ZAS: reakcja biuretowa jest reakcją służącą do wykrycia wiązania peptydowego. Do badanego roztw dodaje się CuSO4 w środu zas. W obecności jonów OH- jony Cu2+ tworzą z wiązaniem peptydowym kompleks o fiol zabar. OBSER: białko jaja kurzego: ciemnofioletowe zabarwienie serwatka: granat zabar albuminy: fioletowe zabarwienie WNIO: we wszysth probówkach nastąpiła zmiana barwy, co świadczy o obecno wiązań peptydowych w analizowanych roztw We wszystkich przypadkach mamy do czynienia z białkami. Natężenie barwy zależy od stężenia białek w próbce. Zmydlanie tłuszczów - reakcja zasadowej hydrolizy estrów wyższych kwasów tłuszczowych, która prowadzi do powstania soli odpowiedniego kwasu oraz alkoholu. Produktami zmydlania tłuszczów są mydła i gliceryna. Wyko: W porcelanowej parownicy rozgrzac na kuchence elektrycznej ok. 1 g smalcu. Do gora smalcu dodac 1.6ml 30% NaOH, a nastepnie 1 ml etanolu. Mieszajac tłuczkiem, ogrzewac do utworzenia sie jednolitej masy mydła. Dodając stopniowo goraca wode (ok. 150 ml), przelac roztwór mydła do zlewki o objetosci 250 ml i kontynuowac ogrzewanie, ciagle mieszajac bagietka, aż do całkowitego rozpuszczenia sie mydła. Wyk: Przygotowac 3 probówki. Do każdej z nich dodac po 2 ml roztworu mydła a naste do 1ej -0.5 ml 1% roztworu CaCl2, od 2ej - 0.5 ml 1% roztworu BaCl2. 3 pozostawic jako próbe kontrolna do porównania.W probówce z chlorkami: wapnia i baru wytraca sie osad nierozpuszczalnych mydeł wapniowych i barowych. Wyk: Przygotowac 2 probówki. Do 1 dodac 4 ml wody destylowanej, 0.5 ml oleju orazodrobine barwnika Sudan III a do 2ej - 4 ml roztworu mydła, 0.5 ml oleju oraz odrobine Sudanu III. Zawar probówek silnie wstrzac W probówce z mydłem wytwarza sie trwała emulsja.
Podział enzymów ze względu na działani Hydrolazy - powodują rozkład substancji złożonych na prostsze, przy czym zostaje przyłączona woda Dehydratazy - odszczepiają wodór, co ma podstawowe znaczenie dla procesów oddychania i fermentacji Desmolazy - powodują przerwanie tzw. łańcuchów węglowych, czyli połączeń między atomami węgla w jednej cząsteczce Klasyfikacja enzymów oparta na typie katalizowanej reakcji Oksydoreduktazy (przenoszenie elektronów) np. dehydrogenaza alkoholowa, oksydaza cytochromowa, katalaza Transferazy (przenoszenie grup funkcyjnych) np. heksokinaza, S-transferaza glutationowa Hydrolazy (reakcje hydrolizy) np. trypsyna, pepsyna, trombina Liazy (rozczepianie wiązań C-C, C-O, C-N) i często tworzenie podwójnego wiązania) np. dekarboksylaza pirogronianowa Izomerazy (przenoszenie grup w obrębie cząsteczki) np. izomeraza maleinianowa Ligazy (tworzenie wiązań sprzężonych z hydrolizą ATP) np. karboksylaza pirogronianowa Typy katalizowanych reakcji Oksydoreduktazy A- + B -->A + B- Transferazy A-B + C -->A + B-C Hydrolazy A-B + H2O -->A-H + B-OH Liazy A-B --> A=B + X-Y Izomerazy A-B --> A-B Ligazy A + B-->A-B Fosfataza kwaśna- enzym z klasy hydrolaz. Jej rola polega głównie na katalizowaniu defosforylacji różnych estrów fosforanowych. Wartość pH dla optymalnego działania fosfatazy kwaśnej mieści się w zakresie od 3,4 do 6,2. Fosfataza alkaliczna- enzym z klasy hydrolaz . Jej rola polega głównie na katalizowaniu defosforylacji różnych estrów fosforanowych. Optymalnie działa w środowisku zasadowym. Ceruloplazmina; z grupy α2-globulin, zawierający w swojej strukturze 6 atomów miedzi. Zawiera ok. 90% miedzi obecnej w surowicy krwi. Bierze udział w homeostazie żelaza i mechanizmach obronnych w stresie oksydacyjnym. czestniczy w transporcie żelaza w surowicy, posiada zdolność utleniania polifenoli i diamin aromatycznych Ceruloplazmina jest główną oksydazą osocza krwi, jej fizjologicznymi substratami są w organizmie są: kwas askorbinowy, adrenalina i noradrenalina. Optymalne pH 5,5-5,8.