Diagnostyka pałeczek z rodziny Enterobacteriaceae

Charakterystyka:

• Oksydazo (-) [ wyj. Plesiamollas shigenoides ] – odróżnienie od innych pałeczek niefermentujących,

• Katalazo (+)

• Przetrwalniki (-)

• Rosną na podłożach zwykłych [wyj. Klebsiella granulomatis ]

• Posiadają lipo polisacharydy

• Fermentują glukozę

• Redukują azotany

• Fermentacja laktozy [ dot. Escherichia coli, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter ] – podłoże MC Conkeya – różowe zabarwienie koloni

• Wzrost 35-27 [ wyj. Yersinia ssp, Erwinia ssp 22-29 ]

• Nie wytwarzają DNAzy [ wyj. Serratia ssp. ]

Grupa KES – Klebsiella ssp. Enterobacter ssp. Serratia ssp. !!!

• Wzrost na podłożu w KCN

• Wzrost na podłożu Simmonsa (wykorzystanie fosforanu amonu jako jedyne źródło azotu, cytrynianu jako jedyne źródło węgla)

• Podłoże Clarka – odczyn Vogesa – Proskauera (VP):

• Wykrywanie acetoiny (z kwasu pirogronowego powstanie glukozy)

• Dotyczy też Hafnia ssp., Pantoea ssp.

• Hydroliza mocznika przez ureazę

• Podłoże Christensena,

• Amoniak alkalizuje podłoże – barwa czerwono- fioletowa

• Dotyczy też:

• P. mirabilis, P. vulgaris,

• Yersinia enterocoitica,

• P. rettgeri,

• M. morganii,

• P. stuartii,

• Y. entercolitica

Wytwarzanie deaminazy fenyloalaniny (+) – niebieskie zabarwienie części skośnej lub całej pożywki (-) – zabarwienie zielone	Proteus ssp Morganella ssp Providencia ssp KES - brak
Wytwarzania indolu	E. coli Morganella morganil KES – brak (wyj. Klebsiella oxytoca)
TEST MIR: Wykrywanie obecności ureazy: (+) – brunatne zabarwienie podłoża Wykrywanie zdolności syntezy indolu z tryptofanu: (+) – czerwony pierścień w powierzchniowej części pożywki	Ob. ureazy Synteza indolu P. vulgaris + + P. mirabilis + - E. coli - +
Zdolność wytwarzania H2S	Proteus ssp. Salmonella Citrobacter freudii Edwardsiella KES - brak
Zdolność do ruchu	Ruchliwe: najbardziej Proteus Nieruchliwe: Klebsiella ssp. Shigella ssp. Yersina pestis Ruchliwe lub nie w zależności od warunków temp. – Yersinia ssp. – ruchliwa w 22 C, nieruchliwa w 37 C
Zdolność do wytwarzania otoczek	Klebsiella ssp. Escherichia coli Citrobacter freudii Kolonie śluzowe – Klebsiella ssp.
Wzrost mgławicowy	P. mirabilis P. vulgaris P. penneri
Wytwarzania barwników	Serratia marcescens – pałeczka krwawa, pałeczka cudowna – PRODIGIOZYNA (prodyginina) laktozoujemna

Podłoża:

1. MC Conkeya z sorbitolem (SMAC)

• Kolonie sorbitolododatnie – różowe,

• Dotyczy: Salmonella, Escherichia, wyjątek E. coli

1. Podłoże XLD:

• Różne zabarwienie w podłoża w zależności od drobnoustroju

Pałeczki nie rozkładające cukrów	Kolonie czerwone
Bakterie fermentujące	Kolonie żółte
Szczepy wytwarzające H2S	Zaczernienie
Salmonella	Kolonie czerwone z czerwonym środkiem
Shigella	Kolonie czerwone
Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella	Kolonie żółte

1. Podłoże Kligera:

• Pozwala zbadać:

• Wytwarzania H2S – „rozerwanie podłoża”, zaczernienie

• Rozkład glukozy – zażółcenie dolnej części podłoża

• Rozkład laktozy – zażółcenie na skosie

Identyfikacja biochemiczna:

1. Wytwarzanie indolu – woda peptonowa z tryptofanem,

2. Rozkład mocznika przez ureazę – p. Christensena,

3. Rozkład glukozy, laktozy oraz wytwarzanie H2S – podłoże Kligera

4. Rozkład laktozy – laktoza 10% nad parafiną

Oporność:

1. Naturalna:

• Penicylina G,

• Glikopeptydy,

• Kwas fusydowy,

• Makrolidy (z pewnymi wyjątkami np. azytromycyna (MIC) dla Salmonella ssp., Shigella ssp.),

• Linkozamidy,

• Streptograminy,

• Rifampicyna,

• Daptomycyna,

• Linezolid

	M. morganii	P. mirabilis	P. vulgaris	P. penneri	P. rettgeri	P. stuarti	S. marcescens	Y. pseudotuberculosis	C. kloseri	E. hermanii	Klebsiella ssp.	Y. enterocolitica	C. freundii	E. cloaceae	E. aerogenes	H. alvei
Polimyksyna, bikolistynę	+	+	+	+	+	+	+	+
Nitrofurantoinę	+	+	+	+	+	+	+
Tetracykliny/tygecyklinę	+	+	+	+	+	+
Tikarcylinę , piperacylinę									+	+	+	+
Cefazolinę	+		+	+	+	+	+	+					+	+	+	+
Cefoksytynę												+	+	+	+	+
Cefamandol			+	+			+					+
Cefuroksym	+		+	+			+

Test Carba NP.:

• Wykrywanie karbapenemaz u Enterobacteriaceae i Pseudomonas ssp.

• Oparty na hydrolizie imipenemu

• Wynik po około 2h

• Umożliwia różnicowanie trzech klas karbapenemaz (A,B,D)