ĆWICZENIE 8 - Wymagania odżywcze
Zadanie 1.
Materiały: hodowla płynna badanego szczepu bakteryjnego, r-r soli fizjologicznej, podłoża A, B, C, D (skład zgodny z podanym w instrukcji głównej)
Wykonanie:
Umieścić 5 ml płynnej hodowli w probówce wirówkowej
Wirować przez 5 min przy 6tys.obr.
Zlać płyn znad osadu
Pozostały osad zawiesić w 5 ml soli fizjologicznej.
Przygotować 4 probówki zawierające po 5ml odpowiednich roztworów: A, B, C, D (każda probówka zawiera inny roztwór!).
Do każdej probówki dodać po 1 ml zawiesiny bakteryjnej przygotowanej w punkcie 4.
Probówki odstawić do inkubacji.
Po 7 dniach porównać wzrost bakterii w probówkach.
Zadanie 2.( amonifikacja)
Materiały: Gleba, podłoże A i B (inne niż w Zadaniu 1!)
Wykonanie:
Przygotować probówkę zawierającą podłoże A i drugą zawierającą podłoże B (po 5 ml).
Zaszczepić obie probówki glebą (oczko ezy).
Inkubować w 37ºC
Po inkubacji sprawdzić ilość wydzielającego się amoniaku przy użyciu odczynnika Nesslera (natężenie barwy zależy od stężenia amoniaku).
Zadanie 3. (zdolność proteolityczna)
Materiały: hodowla bulionowa danego szczepu, szalki Petriego z agarem mlecznym i agarem żelatynowym
Wykonanie:
Wykonać posiew ezą danego szczepu bakteryjnego na płytkę z agarem mlecznym i agarem żelatynowym (luźny zygzak)
Po inkubacji obserwować występowanie jaśniejszych stref w otoczeniu wyrosłych kolonii.
W przypadku niejednoznacznego odczytu nanieść TCA w pobliżu strefy wzrostu.
Zadanie 4. (Źródła węgla)
Materiały: Szalki Petriego z agarem odżywczym i podłożem zawierającym skrobię (po jednej płytce każdego rodzaju na parę).
Wykonanie:
Wykonać posiew ezą danego szczepu bakteryjnego na szalkę z agarem odżywczym i skrobią. Posiew należy wykonać w kształcie linii!
Po inkubacji sprawdzić zdolność mikroorganizmów do hydrolizy skrobi nawarstwiając na płytkę płyn Lugola.
Zinterpretować wyniki wiedząc, że płyn Lugola ze skrobią tworzy kompleks barwiący się na niebiesko.