Metody
s-
określonego składnika
komórek, przyjmując że jego zawartość jest wartością stalą. Związkiem takim jest
(np. metodą luminescencyjną z lucyferyną/lucyferazą lub spektrofotometrycznie z heksokinazą / G-6-P dehydrogenazą)
*) Często stosuje się niepoprawny termin „metoda nefelometryczna” -w tej metodzie mierzy się natężenie światła rozproszonego, pod kątem 90° w stosunku do przechodzącej przez próbę wiązki światła. Zasada pomiaru jest tu analogiczna jak w przypadku fluorymetrii (a nie foto-
-mętni)
OZNACZANIE SUCHEJ MUSY JAKO MIARA BIOMASY -POSTĘPOWANIE OGÓLNE
Sucha masa jest masą komórek z których usunięta została woda (w wyniku odparowania, wysuszenia, liofilizacji)
Aby oznaczyć suchą masę komórki muszą zostać wyizolowane z środowiska fermentacyjnego. Uzyskuje się to albo poprzez filtrację membranową lub wirowanie
Technika filtracji membranowej obejmuje:
• Zawiesina fermentacyjna jest filtrowana poprzez wysuszony, zważony (wyparowany) filtr membranowy (standardowo sączek z octanu celulozy, <j> 47 mm, 0.45 um)
© Filtr jest przemywany celem usunięcia rozpuszczalnych składników medium, i po końcowej filtracji ważony (mokra masa) o Filtr jest suszony w7 temp. 105°C do stałej masy i ważony (sucha masa;
Masa membrany Masa membrany po filtracji (g) - przed filtracją (g) 1000 ml
Sucha masa (sm), g fi ~
x
1 1
Objętość próby (ml)
technika wirowania obejmuje:
© Wirowanie zawiesiny fermentacyjnej w wysuszonych, zważonych (wyparowanych) probówkach przy wysokich obrotach (> 15000 g) & Usunięcie supematantu, przemycie osadu, ponowne wirowanie i zważenie (mokra biomasa)
• Wysuszenie osadu w probówkach (jak wyżej) i zważenie
Masa probówki Masa probówki
po wirowaniu (g) - przed wirowaniem (g) 1000 ml
Sucha masa (sm), g /! —
x
1 1
Objętość próby (mi)