Ćwiczenie : oznaczanie białka ogólnego metodą
, „ Kjeldahla
P,°bek wa *> «W«»nl. białka.
Przesiewam* na sitach (0.75 1.0 mm).
Przygotowanie naważki 1 g.
0dw*ryc próbki, zapisując masę każdej z nich. z zaokrągleniem do 1mg dla naważek ąlg. z zaokrągleniem do 0.1 mg dla nawazek <1 g.
NawaĄi me powinny przekraczać 1,2 g.
Dla próbek o zawartości białka:
cło 5% naważka 1000*1200mg
5-30% naważka 500-1200 mg _
powyżej 30% naważka 200-500mg.
Na ważkę robimy na sączku bezazotowym. ■
mfneratizacyjnych - opisać koib* (jak, zawora ptW*np.
kazdeJ kolt)y z nawazką dodajemy 2 (dwie) tabletki katalizatora które zawierają KjS04 pdw/zsza temperaturę wrzenia kwasu siarkowego i CuS045H20 - związki organiczne ulegają utlenianiu do dwutlenku węgla i wody. a zawarty w nich azot wydziela się w postaci amoniaku, który w środowisku H2SO.-. przechodzi w siarczan amonu (NH^jSO*.
Następnie do każdej kolby mineralizacyjnej z naważką i tabletkami katalizatora dodajemy 12 ml stężonego kwasu siarkowego.
W każdej partii mineralizacyjnej powinna znajdować się ślepa próbka (odczynnikowa) zawierająca złożony, bezazotowy papierek wagowy, dwie tabletki katalizatora i 12 ml kwasu
siarkowego.
2. Włączanie pieca - temp. docelowa 420°C.
Odczekać aż na piecu do mineralizacji pojawi się zielone światełko. Wtedy włącznik należy przycisnąć i trochę przytrzymać do momentu pojawienia się wyświetlacza.
Następnie przyciskamy przycisk pod poleceniem URUCHOM i w lewym górnym rogu wyświetlacza uaktywni się zegar podający jakąś konkretną ilość 8°dz*n i• mmul np. 1:42 znaczy, ze do osiągnięcia temperatury docelowej (temp. docelowa 420 C) mamy 42 minuty a ta pozostała godzina jest na mineralizację (spalanie w kwasie). Czas jest odliczany do tyłu
1:42 dalej 1:41, 1:40 itd. 4 . M<nfU
Kolby mineralizacyjne wstawiamy do spalenia gdy na zegarze będzie 1 godz. (i.wj
3. W digestorium w którym umieszczony jest piec do mineralizacji odkręcamy wodę ( lewy zielony kurek po prawej stronie digestorium) usuwanie oparów kwasu.
4. Na kolby nakładamy odsysacz oparów, bezpośrednio przed i 44C
odsysać/a oparow.
5. Kolby z założonym odsysaczem oparów wstawiamy na piec.