metionina instrukcja1

^OZNACZMIE_DOSTęPN.EJ METIONINY W PRODUKTACH SPOŻYWCZYCH

j

✓

1.    Za3ada_oznaczenia

.

Oznaczenie przyswajalnej metioniny polega na wykorzystaniu specyficznej reakcji barwnej grup — SCH- z nitroprusydkieni sodu, po uprzedniej hydrolizie enzymatycznej białka, Sulfbtlenek i sulfon metioniny nie reagują z nitroprusydkiem sodu, stąd nie mają wpływu na wynik oznaczania.

2.    El5Yo2£owanie_pr2b_OilS^2_

Mleko "butelko w e "

3

Około 0,5 dm mleka butelkowego o zaw. tłuszczu 2% rozdziela się na 2 porcje po 200 cm oraz dwie porcje po ok. 50 cm^J. Jedną z mniejszych porcji pozostawia się O¹ na surowo y natomiast do drugiej dodaje

2 cui^J 3% roztworu H^Op. Pozostałe dwie większe porcje zagotowuje się przy czyrn porcję .czwartą po ostudzeniu zagotowuje się powtórnie.

Mleko w proszku

Porcję mleka odtłuszczonego w proszku rozprowadza Się gorącą wodą . zgodnie'z przepisem podanym na opakowaniu, tak aby otrzymać ok. 200 crn^J płynu. Porcję 150 cm^ z tak przygotowanego mleka zagotowuje się.

Resztę pozostawia się bez gotowania. Oznaczenie dostępnej metioniny wykonuje się w sześciu próbach mleka przygotowanych w opisany poniżej sposób.    ,    •

f

i

I    «*«

3. Trawienie enzjmatyczne_białka_cankreat^ną_

W zlewce o poj. 50 cm^ rozprov.^radza śię próbkę mleka odpowiadającą ok, 12 mg N /w praktyce 4-^5 , cm "V w(20? crr.^ buforu fosforanowego o stę-żeniu 0,05 inol^ćta'' i pH 8,2. Następnie dodaje się 0,1 co^J toluenu i(l*° cm^ 2% roztworu pankreatyny /podobnie lecz bez enzymu przygotowuje się ślepą próbę odczynnikową/. Wszyatkie próby wstawia się na 24 godziny do termostatu o temp. 40 .°C^p£istępnie wytrąca się nie s trawione białko dodając 0,jL ctn^ HCIO^, /o stęż. 1,6 mol/dm / na każdy en," hydrolizatu?'Po/30 minutach próby sączy się przez twardy sączek i przemywa wodą destylowaną.Przesącz zbiera się do zlewki i doprowadza do pH 7 /wg papierka wskaźnikowego/ za pomocą krystalicznego KHCC^, a następnie dokładnie mierzy ostateczną objętość płynu.

I