plik


ÿþwiczenie 7 (MOiZ) T: Identyfikacja bakterii do gatunku na podstawie ich wBa[ciwo[ci fizjologicznych i biologicznych. 1) Szeregi biochemiczne  metoda klasyczna 2) Szybkie testy biochemiczne typu API W identyfikacji wykonuje si co najmniej 20 testów biochemicznych. Czasami nale|y wykona nawet 50 poniewa| tylko 90% szczepów wykazuje wszystkie typowe cechy gatunku. Du|a uci|liwo[ w przygotowywaniu podBo|y i samej identyfikacji spowodowaBa opracowanie szybkich testów identyfikacyjnych. Jedn z najwikszych firm produkujcych takie testy jest API. 1) Testy API Oparte na identycznych podBo|ach i odczynnikach co tradycyjne testy ale wszystkie skBadniki podBo|a s w formie zliofilizowanej i umieszczone s w niewielkich minikuwetkach. Kuwetki te uksztaBtowane s w plastikowej kasetce. CaBo[ umieszczona jest w rynience. Wyró|niamy rozmaite testy API: API 20 E - IDENTYFIKACJA BAKTERII Z RODZINY ENTEROBACTERIACEAE W OPARCIU O 20 CECH BIOCHEMICZNYCH API 20 STREP - IDENTYFIKACJA BAKTERII Z GRUPY STREPTOCOCCUS W OPARCIU O 20 CECH BIOCHEMICZNYCH API 20 STAPH - IDENTYFIKACJA BAKTERII Z GRUPY STAPHYLOCOCCUS W OPARCIU O 20 CECH BIOCHEMICZNYCH API 20 NE  non Enterobacteriaceae API 50 CHB  IDENTYFIKACJA BAKTERII Z GRUPY BACILLUS W OPARCIU O 50 CECH BIOCHEMICZNYCH API RAPID  odczyt nastpuje ju| po 4 godzinach ale czuBo[ identyfikacji jest nieco gorsza Procedura identyfikacji za pomoc testów API 1. Inokulacja: a) otrzymujemy 24 godzinn hodowl mikroorganizmów na podBo|u staBym b) koloni bakteryjn zawieszamy w 5 ml 0,85% NaCl c) umieszczamy zawiesin w doBkach wg instrukcji producenta (rys.1) ·ð Do wszystkich doBków wlewamy pipet zawiesin tak, |eby nie wtBoczy pod plastikowe osBonki pcherzyków powietrza. ·ð Zawiesin wlewamy tylko pod plastikowe osBonki, pozostawiajc  miseczki nie zapeBnione (patrz rysunek). ·ð Testy, których oznaczenia otoczone s trzema kreskami zalewamy do koDca zawiesin (a| do menisku wypukBego) ·ð Testy, których oznaczenia s podkre[lone pojedyncz kresk zalewamy parafin a| do menisku wypukBego. ·ð Reszta testów pozostaje bez zmian. d) Do rynienki wlewamy wod, a nastpnie umieszczamy tam kasetk z testami e) inkubujemy 24-48 h w optymalnej dla danego organizmu temperaturze 1 wiczenie 6b. Mikrobiologia ogólna i[rodowiskowa. PrzygotowaB: Jakub Baranek Rys.1. Instrukcja umieszczania zawiesiny bakteryjnej w testach API 2. Odczyt testów identyfikacyjnych API f) po inkubacji testu dodajemy odczynniki wg instrukcji producenta: do TDA dodajemy FeCl3 do VP dodajemy po 1 kropli KOH i alfa-naftolu g) inkubujemy test jeszcze kilkana[cie minut (opcjonalnie) h) odczytujemy reakcje dodatnie i ujemne, korzystajc z instrukcji producenta i) wprowadzamy wyniki do programu komputerowego APILAB i wskazujemy gatunek bakteryjny. Je|eli w programie komputerowym wynik identyfikacji jest wtpliwy, caBy test nale|y powtarza a| do uzyskania wiarygodnego wyniku ZADANIE: 1) Zidentyfikowa gatunek bakterii na podstawie podanych testów biochemicznych metod klasyczn 2) Zidentyfikowa gatunek bakterii za pomoc testu API 2 wiczenie 6b. Mikrobiologia ogólna i[rodowiskowa. PrzygotowaB: Jakub Baranek

Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
Badanie czystości metodą klasyczną
7 30 marca 2011 Identyfikacja bakterii
Ćwiczenie 5 Pożywki bakteriologiczne Ocena wzrostu na poszczególnych podłożach 2012
Obliczanie wielomianu metodÄ… klasycznÄ… i metodÄ… Hornera Temat 1
Ćwiczenie 11 Bakterie Amonifikacyjne i proteolityczne
Ćwiczenie 4 choroby bakteryjne
Ćwiczenie 6 testy identyfikacyjne 2012
3 ćwiczenia szacowanie parametrów modeli liniowych klasyczną metodą najmniejszych kwadratów
Cwiczenie 07 Testy penetracyjne ataki DoS
Cwiczenie 12 Obliczanie statecznosci danych metoda Fp Maslowa
PG materiały do ćwiczeń testy
Identyfikacja składu mineralnego surowców ilastych i składu fazowego tworzyw metodą XRD
Metoda Dennisona zestaw ćwiczeń ułatwiających sprawność umysłową

więcej podobnych podstron