3784495996

Załącznik nr 2. Tomasz Mroczek - Autoreferat w języku polskim z wykorzystaniem sorbentu XTerra RP-18 oraz gradientu acetonitrylu w 15 mM wodorotlenku amonu [7], Skorelowałem wyniki analizy jakościowej i ilościowej dla obu metod analizy alkaloidów Amaryllidaceae (HPTLC-densytometra-UV vs RP-HPLC/DAD). Zmierzone wartości współczynników korelacji r dla wyznaczonych zawartości galantaminy i likoryny wyniosły odpowiednio 0,98823 oraz 0,99081 [7], co wskazuje wysoką korelację wyników oznaczeń ilościowych dla obu komplementarnie zastosowanych metod chromatograficznych. Metoda RP-HPLC/DAD była ok. 10 razy bardziej czuła od metody HPTLC-densytometria-UV oraz była nieco bardziej precyzyjna.

4.3.2 Metody oparte na połączeniu HPLC z podwójną detekcją DAD oraz MS

Wprawdzie niedrogie i nieskomplikowane w sensie użytego aparatu analitycznego metody opierające się na HPTLC-densytometrii-UV czy tez RP-HPLC/DAD mogą być wydajnie użyte do badań zarówno jakościowych jak i ilościowych różnych typów alkaloidów, co opisano powyżej, to jednak nie możliwa jest dokładniejsza analiza typów struktur, czy też poszukiwanie nowych związków naturalnych z ich użyciem, gdyż informacje oparte tylko na analizie widm UV nie są wystarczające. To skłoniło mnie do zainteresowania się technikami opartymi na metodach HPLC z podwójną detekcją UV oraz MS. Wyniki tych badań oraz wynikające z nich inklinacje strukturalne zawarłem w publikacjach: [1], [2], [3], [8], [9], [10] oraz podczas wystąpień konferencyjnych oraz kursach szkoleniowych: [Wl], [W2], [W3], [W4], [W5], [W6], [W7],

W badaniach alkaloidów pirolizydynowych początkowo zastosowałem metodę RP-HPLC na sorbencie RP-18 typu slabie bond i fazie ruchomej w postaci gradientu acetonitrylu w 0,1% r-rze kwasu mrówkowego w wodzie połączonej z detekcją DAD oraz El MS (źródło typu thermabeam) [1]. W zakresie DAD widma alkaloidów pirolizydynowych nagrywałem przy 220 nm, natomiast analizator El MS był ustawiony zarówno w trybie Całkowitego Prądu Jonowego (TIC) jak SIM (Selected łon Monitoring - wyselekcjonowanych wartości m/z : 119, 120, 136, 219, 220), a więc wartości m/z charakterystycznych dla toksycznych, hepatokancerogennych alkaloidów pirolizydynowych. Ten typ źródła oraz analizatora mas był stosunkowo mało czuły oraz wykazywał się bardzo wysoką efektywnością fragmentacji, ze stosunkowo małym natężeniem jonów molekularnych, jednakże stanowiąc nieskomplikowane i szybkie narzędzie w poszukiwaniu kancerogennych, toksycznych PAs w substancjach roślinnych. W ten sposób, stosunkowo krótkim czasie możliwe jest określenie

15