3784495997

Załącznik nr 2. Tomasz Mroczek - Autoreferat w języku polskim występowania toksycznych PAs w substancjach roślinnych, co najczęściej dyskwalifikuje tę substancję roślinna ze stosowania w terapii do stosowania wewnętrznego.

W kolejnych dwóch publikacjach [2] i [3] opisałem bardzo efektywne wykorzystanie połączenia metody RP-HPLC z detekcją DAD oraz APCI-IT-MS w badaniach strukturalnych zarówno toksycznych jak i nietoksycznych PAs. Alkaloidy obecne w ekstraktach roślinnych uprzednio oczyszczone i zatężone w oparciu o metodę SPE na sorbencie jonowymiennym -kationicie [2] lub z wykorzystaniem metody SSLLP [3] opisanej w p 4.2. rozdzielałem na sorbencie RP-18 typu charge transfer w gradiencie acetonitrylu w 15 mM wodorotlenku amonu. Polarne JV-tlenki PAs jak i niepolame zasady III-rzędowe analizowałem z wykorzystaniem bardzo czułego połączenia źródła typu APCI z analizatorem mas typu pułapka jonów (IT-MS). W ten sposób przebadałem szereg ekstraktów roślinnych zawierających PAs. W przykładowym ekstrakcie uzyskanym z ziela Onosma stelulatum (Compsitae) bazując na uzyskanych widmach fragmentacyjnych APCI-IT-MS oraz zmierzonych masach sprotonowanych jonów [M+H]⁺ określiłem po raz pierwszy w tej substancji roślinnej 12 różnych typów struktur PAs obejmujących: A-tlenek leptantyny, N-tlenek likopsaminy, likopsaminę, N-tlenek trachelantaminy, dihydroechinatynę, leptantynę, N-tlenek heliospatuliny, 7-acetylointermedynę, uplandycynę, echimidynę oraz N-tlenek echimidyny. Poszerzyłem również zakres uprzednio zidentyfikowanych PAs w zielu Emilia coccinea (Compositae) o następujące typy struktur PAs: A-tlenek platyfylliny, platyfyllinę, ligularydynę, neoligularydynę oraz neosenkirkinę.

Stosując to samo połączenie RP-HPLC/DAD/APCI-IT-MS po raz pierwszy zidentyfikowałem w korzeniach Symphytum cordatum (Boraginaceae) 18 typów struktur PAs [3], obejmujących: A-tlenek echimidyny (3    diastereoizomery), 7-saracynylo-9-wiridifloryloretronecynę

(2 diastereoizomery), echimidynę (2 diastereoizomery), likopsaminę (2 diastereoizomery), N-tlenek dihydroechinatyny,    A^-tlenek dihydroheliospatuliny, N-tlenek likopsaminy

(3 diastereoizomery), A-tlenek 7-acetylolikopsaminy, N-tlenek symfytyny (2 diastereoizomery) oraz A-tlenek 2”,3”-epoksyechiuminy. W ten sposób wykazałem wysoką przydatność tej techniki chromatograficznej sprzężonej z detekcją UV oraz APCI-IT-MS w badaniach strukturalnych bardzo złożonych PAs często występujących w śladowych stężeniach w ekstraktach roślinnych.

Moje kolejne zainteresowania nad wykorzystaniem technik chromatograficznych sprzężonych z DAD i MS skierowałem na bardzo złożoną pod względem strukturalnym grupę alkaloidów Amaryllidaceae, która obejmuje kilkanaście różnych typów struktur, wśród których należy wymienić pochodne: likoryny, galantaminy, likoraminy, homolikoryny, haemantaminy,

16