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PROBLEMES D^IMMUNOLOGIE 333

temoignent la numeration bacterienne et le dosage de la mucinase dans les liąuides intestinaux des animaux victimes de Pinfection. Le laps de temps entre Pinfection et la mort n’a pas ete modifie non plus; il a ete le mćme chez les temoins et chez les animaux vaccines qui succomberent,

Ainsi qu’on Pa vu au chapitre 3, les experiences de Lam et ses colldgues (1955) suggeraient que la mucinase augmentait la permeabilite de Pintestin de la souris, comme Pindiquent Paugmentation de la pression manometrique des intestins et Paccroissement du poids de Pintestin gr£le excise, a la suitę d’une absorption d’eau par les parois de Pintestin. Apres que Pon eut decouvert que Pimmunisation passive des animaux contrę la mucinase inhibait Paction de cet enzyme sur Pintestin, les differentes methodes d’immu-nisation active ont ete comparees. Plusieurs groupes d’animaux ont reęu a cet effet a)du vaccin choleriąue tue; b) de la mucinase; c) unecombinaison de mucinase et de vaccin. Ona pu ainsi etablir que Pintestin excisć de la souris qui avait ete

< immunisće activement par la mucinase de K comma et testee avec une mucinase active, donnait des chiffres comparables k ceux que Pon obtenait par immunisation passive, c’est-a-dire une legere augmentation de la pression k Pinterieur du lumen intestinal, mais sans comparaison avec celle que Pon observe chez Panimal non immunisć. Des resultats comparables ont iii obtenus k la suitę de Pimmunisation par la mucinase et V, comma tue par un agent chimique.

D’autre part, des preparations provcnant de souris immunisćes par des cellules bacteriennes seulement, sans mucinase, etaient beaucoup plus sensibles k la mucinase que les temoins non immunises.» [Trąd,]

On a obtenu des resultats identiques dans des experiences in vivo au cours desąuelles on introduisait de la mucinase dans Pintestin gr£le in situ.

Lowentbal (1956) a decrit une nouvelle methode de production d’une preparation liąuide de mucinase, qui resterait stable, combinee en propor-tions variables avec du vaccin anticholerique. Les principafes etapes de cette methode sont les suivantes:

Du bouillon de cueur de bceuf doublement concentrć est dialysć k 4°C, pendant 24 heures, contrę un volume egal d’eau distillee. Ce processus est repete k trois reprises en tout, avec de Peau distillee fraiche chaąue fois, Les trois dialysats combinśs sont ense-mences par une culture de 6 heures de V. cholerne developpee dans le meme milieu et misę a Petuve a ll°C pendant 17 heures, dans un appareil a roulement de faęon k assurer une aeration maximum sans formation excessive d'ćcume.

Apres quoi, les bacteries sont eliminees par centrifugation et filtra tion sur bougies Berkefeld. Le filtrat est alors sature a moitie par du sulfate d^ammonium solide. Apres sejour d^łune nuit au froid, le sćdiment est dissous dans le solute tampon au borate jusqu’a ce que le dialysat ne precipite plus avec une solution saturee de chlorure de baryum. Le produit est alors stórilisć par passage sur filtre Selas.

Au moyen de tests choisis k cet effet, Lowenthal a pu ćtablir que a) la solution de mucinase preparee par cette methode gardait son activite muci-nolytique in vitro pendant plus de deux ans; b) sa combinaison avec le vaccin cholerique n’affectait pas Pactivite in vitro de Fenzyme, ni Fanti-