UNIWERSYTET PRZYRODNICZY
Wydział Medycyny Weterynaryjnej
KATEDRA BIOCHEMII I FIZJOLOGII ZWIERZĄT
Zakład Biochemii
20-033 Lublin, ul. Akademicka 12
tel. 081 445 69 73
09-11-19 www.biochfiz.up.lublin.pl Wersja 2.19.11.09
- 1 z 2 -
Płyny ustrojowe
krew
Zadania 1 – 3 wykona
ć
u
Ŝ
ywaj
ą
c osocza jako próby. Zadanie 4
wykona
ć
u
Ŝ
ywaj
ą
c krew pełn
ą
jako prób
ę
.
Wyniki zada
ń
1 - 2 zanotowa
ć
w tabeli.
Oznaczenie
Wynik
Wykrywanie jonów Cl
-
Wykrywanie jonów SO
4
-2
Wykrywanie jonów HPO
4
-2
Wykrywanie jonów Ca
+2
Wykrywanie
Ŝ
elaza
Wykrywanie glukozy
Zadanie 1.
Wykrywanie nieorganicznych składników osocza krwi
Wykonanie.
Do 5 cm
3
osocza doda
ć
5 cm
3
wody destylowanej i 5 cm
3
5% TCA.
Odczeka
ć
15 min. Po tym czasie zawarto
ść
odwirowa
ć
10 min. 3000
obr./min. W bezbiałkowym przes
ą
czu osocza wykona
ć
nast
ę
puj
ą
ce próby:
a.
Wykrywanie jonów Cl
-
Do 0,5 cm
3
przes
ą
czu doda
ć
2 krople 0,2% AgNO
3
– wytraca si
ę
serowaty osad AgCl
b.
Wykrywanie jonów SO
4
-2
Do 0,5 cm
3
przes
ą
czu doda
ć
2 krople 5% BaCl
2
– powstaje białe
zm
ę
tnienie pochodz
ą
ce od BaSO
4
c.
Wykrywanie jonów HPO
4
-2
Do 0,5 cm
3
przesaczu doda
ć
0,5 cm
3
molibdenianu amonowego i 0,5 cm
3
st
ęŜ
. HNO
3
. Po zagotowaniu powstaje
Ŝ
ółty osad fosforomolibdenianu
amonowego.
d.
Wykrywanie jonów Ca
+2
Do 0,5 cm
3
przes
ą
czu doda
ć
0,5 cm
3
szczawianu amonowego i kilka
kropli st
ęŜ
. NH
4
OH – zm
ę
tnienie roztworu pochodzi od szczawianu
wapnia.
UNIWERSYTET PRZYRODNICZY
Wydział Medycyny Weterynaryjnej
KATEDRA BIOCHEMII I FIZJOLOGII ZWIERZĄT
Zakład Biochemii
20-033 Lublin, ul. Akademicka 12
tel. 081 445 69 73
09-11-19 www.biochfiz.up.lublin.pl Wersja 2.19.11.09
- 2 z 2 -
e.
Wykrywanie
Ŝ
elaza
Do
0,5
cm
3
przes
ą
czu
doda
ć
kilka
kropel
20%
kwasu
sulfosalicylowego i 0,5 cm
3
st
ęŜ
. NH
4
OH –
Ŝ
elazo w
ś
rodowisku
alkalicznym tworzy z kwasem sulfosalicylowym zwi
ą
zek wewn
ą
trz
kompleksowy o barwie
Ŝ
ółtej.
Zadanie 2.
Wykrywanie składników organicznych osocza krwi
Wykonanie.
a.
Wykrywanie glukozy
Do 0,5 cm
3
osocza krwi doda
ć
2 krople odczynnika Molischa.
Wymiesza
ć
i ostro
Ŝ
nie wprowadzi
ć
1 cm
3
st
ęŜ
. H
2
SO
4
. Na pograniczu
obu płynów powstaje czerwono fiołkowy kr
ąŜ
ek
Zadanie 3.
Wykazywanie wła
ś
ciwo
ś
ci buforowych krwi
Wykonanie.
Do 4 erlenmajerek doda
ć
:
I.10 cm
3
H
2
O dest. i 3 krople bł
ę
kitu bromofenolowego
II.9 cm
3
H
2
O dest., 1 cm
3
osocza i 3 krople bł
ę
kitu bromofenolowego
III.10 cm
3
wody dest. i 2 krople fenoloftaleiny
IV.9 cm
3
wody dest., 1 cm
3
osocza i 3 krople fenoloftaleiny
Do erlenmajerek I i II doda
ć
0,1 M HCl. Do erlenmajerek III i IV
doda
ć
0,1M
NaOH.
Opó
ź
nienie
zakwaszenia
lub
alkalizacji
układu
wyst
ę
puje dzi
ę
ki obecno
ś
ci we krwi układów buforowych.
Zadanie 4.
Wpływ czynników chemicznych i fizycznych na trwało
ść
erytrocytów
Wykonanie.
Do 4 probówek doda
ć
po 4 krople krwi oraz:
−
do pierwszej doda
ć
5 cm
3
0,9% NaCl
−
do drugiej 5 cm
3
wody destylowanej
−
do trzeciej 5 cm
3
0,9% NaCl i par
ę
kropel chloroformu lub eteru
−
do czwartej doda
ć
5 cm
3
2% NaCl
Ka
Ŝ
d
ą
probówk
ę
energicznie wymiesza
ć
i zaobserwowa
ć
zachowanie si
ę
krwinek czerwonych we wszystkich przypadkach.