Fizjologia bakterii
„Najlepszym środowiskiem życia
drobnoustrojów jest takie środowisko,
które w pełni dostarcza im wszelkich
koniecznych składników odżywczych,
oraz stwarza im najlepsze warunki
środowiskowe”
I. SKŁADNIKI ODŻYWCZE
WĘGIEL
Jest niezbędny do wzrostu wszystkich bakterii
Bakterie autotroficzne
– CO
2
jako jedyne
źródło węgla
Bakterie heterotroficzne
– węglowodany,
aminokwasy (bardziej złożone składniki
odżywcze)
JONY NIEORGANICZNE
Jony są niezbędne do wzrostu wszystkich bakterii
K
+
, Mg
2+
, N, S, fosforany i wiele metali śladowych
Bakterie halofilne
– do optymalnego
wzrostu wymagają dużego stężenia sodu
SKŁADNIKI ORGANICZNE
W różnych ilościach w zależności od różnych
gatunków drobnoustrojów są niezbędne do ich
wzrostu
Np.
węglowodany, aminokwasy, krótkołańcuchowe
polipeptydy, witaminy, puryny, pirymidyny
CZĄSTECZKI BĘDĄCE DONORAMI
ELEKTRONÓW
Np.
amoniak, azotyny, siarkowodór
– źródło energii
CZĄSTECZKI BĘDĄCE AKCEPTORAMI
ELEKTRONÓW
Tlen
– oddychanie tlenowe
Pirogronian, mleczan i inne związki
- fermentacja
II. Wzrost
TEMPERATURA
Bakterie psychrofilne
– najlepiej rosną w temp.
0 – 10
0
C
Bakterie mezofilne
– najlepiej rosną w temp. 20
– 40
0
C
(większość bakterii chorobotwórczych dla człowieka)
Bakterie termofilne
– najlepiej rosną w temp. 50
– 60
0
C
pH
Dla większości bakterii chorobotwórczych optymalne
pH zawarte jest pomiędzy
6,8 – 7,4
TLEN
Zapotrzebowanie:
(5 grup)
Bezwzględne tlenowce
– wzrost hamowany
ograniczoną dostępnością tlenu w
środowisku.Bakterie wymagają obecności tlenu
atmosferycznego.
Bezwzględne beztlenowce
- wzrost
hamowany niskim ciśnieniem tlenu (10
-5
atm.). Giną
przy 0,5% tlenu
Względne beztlenowce
– wykorzystują
cząsteczkowy tlen i ze związków organicznych. Flora
fizjologiczna przewodu pokarmowego człowieka
Bakterie mikroaerofilne
- rosną w
zwiększonym ciśnieniu parcjalnym CO
2
(5 – 15%)
Bakterie aerotolerancyjne
– mogą przeżyć,
ale nie rosnąć w obecności tlenu atmosferycznego
PODŁOŻA
I podział: (ze względu na jakość składników)
Naturalne
Półsyntetyczne
Syntetyczne
II podział: (ze względu na konsystencję)
Płynne
Półpłynne
Stałe
III podział – (ze względu na skład)
Podłoża proste
Podłoża wzbogacone
Podłoża wybiórczo – namnażające
Podłoża wybiórczo – różnicujące
Podłoża specjalne
Podłoża transportowe
I podział:
• Podłoża naturalne
– skład jakościowy i ilościowy
bliżej nieokreślony
• Podłoża półsyntetyczne
- skład jakościowy i
ilościowy znany w przybliżeniu
• Podłoża syntetyczne
- o ściśle określonych
składzie chemicznym i ilościowym
II podział:
• Podłoża płynne
– np.. Bulion mięsny, bulion
cukrowy
• Podłoża półpłynne
– z dodatkiem agaru 0,5 – 1%
• Podłoża stałe
– podłoża agarowe 1,5 – 3,0 %
III podział:
Podłoża proste
- płynne – bulion cukrowy
- stałe – agar zwykły
Dla wzrostu drobnoustrojów o niskich
wymaganiach wzrostowych
Podłoża wzbogacone
– z dodatkiem krwi,
surowicy lub innych składników
wspomagających wzrost. Podłoża
namnażające.
- płynne - bulion mózgowo – sercowy
- stałe - agar krwawy,
• Podłoża wybiórcze:
Wybiórczo - namnażające
- są to podłoża z
dodatkiem substancji, które umożliwiają
wzrost tylko określonych gatunków bakterii
np.
Podłoże Loewensteina – Jensena – dla prątków
(Mycobacterium)
Agar czekoladowy - wg Vogesa – dla dwoinki
rzeżączki
Pożywka SF – do izolacji Salmonella i Shigella
Podłoża do izolacji np. Helicobacter pylori
Wybiórczo - różnicujące
– są to podłoża
wybiórcze zawierające dodatkowo czynnik
różnicujący i wskaźnik (np. wskaźnik zmiany pH
– purpura bromokrezolowa, czerwień fenolowa,
błękit bromotymolowy). Zmiana zabarwienia
podłoża w trakcie wzrostu informuje o
określonej właściwości danego substratu.np..
- Mac Conkeya – dla bakterii z rodziny
Enterobacteriaceae
(rozkład laktozy - zmiana pH – kolonie różowe)
- Chapmana – dla gronkowców
(rozkład manitolu – zmiana PH – zmiana
zabarwienia podłoża z amarantowego na żółte)
- Clauberga dla maczugowców
(z telurynem potasu – wzrost w postaci
czarnych, metalicznych kolonii)
Podłoże Sabourauda – dla grzybów
Podłoże SS – dla wzrostu Salmonella, Shigella
Podłoże z cetrimidem – dla wzrostu pałeczek
Pseudomonas
Podłoża specjalne
– są to podłoża z dodatkiem
węglowodanów
lub
innych
specyficznych
substratów. Służą np. do określania cech
biochemicznych.
Do oznaczania lekowrażliwości:
1.
Muellera - Hintona
Krótki szereg biochemiczny dla bakterii z
rodziny Enterobacteriaceae
1. Podłoża Kliglera
2. Podłoże z 10% laktozą pod parafiną
3. Woda peptonowa z tryptofanem
4. Podłoże Christensena
Podłoże Kliglera –
rozkład glukozy, laktozy,
wytwarzanie H
2
S i gazu
Rozkład glukozy = skos łososiowy + słupek żółty
Rozkład laktozy = skos żółty + słupek żółty
Brak rozkładu cukrów = barwa czerwona
Wytwarzanie H
2
S = czarny strąt (pierścień)
Wytwarzanie gazu = popękanie skosu
Podłoże z laktozą pod parafiną
–
beztlenowy rozkład laktozy
Zmiana zabarwienia z fioletowego na żółty
Woda peptonowa z tryptofanem
– rozkład
tryptofanu do indolu
odczynnik Ehrlicha – zmiana zabarwienia na
ciemnoróżowe
Podłoże Christensena
– rozkład mocznika przez
ureazę
Zmiana zabarwienia podłoża z żółtego na
różowoamarantowe
Inne dodatkowe: (szereg wzbogacony) np.
Podłoże Simonsa
– z malonianem lub cytrynianem jako jedyne
źródło węgla ( z zielonego na niebieskie)
Podłoże Clarka
- namnażające do prób MR i VP
MR – (methyl – red) typ fermentacji glukozy (do kwasów)
+ czerwień metylowa = pH>4,5 czerwone, pH>4,5 żółte
VP – (Vogesa – Proskauera) typ fermentacji glukozy (do acetoiny)
+ KOH i α-naftol = karminowe zabarwienie
Podłoża transportowe:
Służą do zabezpieczenia żywotności
drobnoustrojów podczas transportu do
laboratorium próbek materiałów.
1.
Podłoża transportowe – zestaw transportowy
nr 1
2.
Podłoża transportowo – wzrostowe np..
Uromedium, podłoża do posiewu krwi.
Rodzaje posiewów
Posiew murawkowy:
Posiew redukcyjny:
ma na celu wyizolowanie
pojedynczych kolonii drobnoustrojów
1 komórka bakteryjna = 1 kolonia (klon)
Metody hodowli beztlenowców
Eksykator anaerostat
GEN- box Gas - Pack
Opisy kolonii (morfologia)
Kształt
Wielkość
Brzeg
Powierzchnia
Struktura
Kolor
Konsystencja
Zapach
Inne np. typ hemolizy