Wykonanie: Mazurkiewicz Marek

Zajęcia 3 18-10-2010

Temat: Fotometryczne oznaczanie zawartości białka

1. cel:

Poznanie praktyczne techniki fotometrycznego oznaczania zawartości białka metodą Lowry’ego i współpracowników

2. zasada metody: Białko poddaje się reakcji biuretowej. <del>Jony Cu²⁺ dają barwne kompleksy pod wpływem odczynnika Folina.<del> Na podstawie absorbancji roztworu i krzywej wzorcowej określa się stężenie białka.

3. obliczenia:

   dane:

   
   zadanie kontrolne: kolbka nr1 wykazała absorbancje 0,111 oraz 0,104 co daje średnią 0,1075 co według wykresu (dokładniejszy wykres na oddzielnej stronie) odpowiada 56 µg/ml białka

   proporcje:

   w 0,5 ml próby znajduje się 28 µg białka

   w 10 ml(w kolbce) znajduje się x=560 mg białka

Do kolbki, przed dopełnieniem jej woda do objętości 10 ml wlano np. 1,5 ml analizowanego roztworu albuminy technicznej.

w 1,5ml albuminy technicznej było 560 mg białka

w 1000ml albuminy technicznej było y=373333 mg białka

373333 mg jest równe 373 mg

W 1000 ml rozpuszczono 500 mg albuminy technicznej zatem 373 mg stanowi 74,7%

3. Wniosek: Obliczony procent czystości albuminy, w jej preparacie handlowym wynosi 74,7% czystego białka.

   ocena: 3,0