Utrwalanie:

-dobór utrwalacza

-czas utrwalania

-barwienie

-rodzaj tk.

-rodzaj techniki

Utrwalacze:

-formalina

-płyn Bouin’a

-etanol

-parafarmaldehyd

-aldehyd glutanowy

-inne

Utrwalanie i płukanie próbek:

-by pozbyć się nadmiaru utrwalacza

-jak w skł. Utrwalacza nie było alko lub

kw.pikrynowego płuczemy wodą i przekładamy

do alko 70-80% i przechowujemy w 4st.

Zatapianie : Odwadnianie:

-alko etylowy o rosnącym stęż 80-99,9%

Płyny Pośrednie:

-ksylen

Zatapianie w parafinie:

-parafina z ksylenem 1:1

-parafina

-bloczki parafinowe

Krojenie:

-mikrotom rotacyjny

-suszenie 37st 24h

-przechowywanie

Barwienie:

-histologiczne

-histochemiczne

-immunohistochemiczne

-pojedyncze

-złożone

-progresywne

-regresywne

Barwniki histologiczne:

-zasadowe (hematoksylina, czerwień jądrowa, fuksyna zasadowa)

-kwaśne (eozyna, zieleń świ., kw. Pikrynowy)

-obojętne (czerwień oleista, Sudan 3, sudan 4)

H&E – barwienie topograficzne z użyciem 2 barwników hematoksyliny i eozyny

AB/PAS-kw. hadiodowy - barwienie wykonywane w celu

zróżnicowania śluzowielocukrów kwaśnych i obojętnych.

Obojętne mają silne powinowactwo do odczynnika schiffa,

gdy błękit alcjanu barwi śluzowielocukry kwaśne

3 Bariwnie Massona-

-z użyciem czerwieni Scarlet, hematoksyliny wg. Weigherta i błękitu aniliny

Barwienie immunohistochemiczne:

-barw, przy uzyciu przeciwciała (PCNA,CDB)

Ostateczne wykończenie preparatów mikroskopowych:

Sub do zaklejania: chronią przed wyschnięciem, dobre właści

wości optyczne, nie wchodzą w reakcję z preparatem

Media do zaklejania preparatów:

-żywica naturalna – balsam kanadyjski

-żywica syntetyczna- np.dpx

-glicerożel