Mikrobilogia zywności9

Oznaczanie miana coli na podłożu z zielenią brylantową

żółcią

Do probówki zawierającej 9 cm podłoża z zielenią brylantową, żółcią [14] i rurką Durhama posiewa się 1 cm zawiesiny po hemogenizacji. Po dokładnym wymieszaniu przenosi się 1 cm do następnej probówki, uzyskując w ten sposób kolejne dziesiętne rozcieńczenie itd. Probówki inkubuje się w temperaturze 37°C przez 48 godzin Po inkubacji, na podstawie wydzielonego gazu, zmętnienia i zmiany barwy, określa się miano coli badanego produktu.

Sprawdzanie obecności bakterii z grupy coli na podłożu Endo

Z płynnej hodowli, np. na podłożu Eijkmana lub z zielenią brylantową, wskazującej na wzrost coli wykonuje się posiewy na podłoże Endo [16]. Jest to podłoże stałe, zawierające oprócz laktozy siarczyn sodowy i fuksynę. Fuksyna zostaje zredukowana siarczynem do bezbarwnej formy leukofuksyny. W przypadku obecności bakterii z grupy coli, które dobrze rosną na tym podłożu, zostaje wytworzony z laktozy aldehyd octowy, dający z leukotuksyną zabarwienie czerwone. Kolonie bakterii coli rosną na podłożu Endo w postaci kolonii czerwonych z metalicznym połyskiem lub różowych, a często różowych z czerwonym środkiem. Posiewy wykonuje się ezą lub jałową pipetą z rozcieńczenia.

Oznaczanie miana enterokoków

Do enterokoków (paciorkowców kałowych) zalicza się drobnoustroje przewodu pokarmowego z rodzaju Enterococcits. Enterokoki rosną w szerokim zakresie temperatury (10-45°C), są odporne na działanie żółci (rosną nawet przy stężeniu 40% żółci), są ciepłoopome, gdyż wytrzymują ogrzewanie w temperaturze 60°C przez 30 minut. Ponadto są odporne na NaCl; rosną przy stężeniu soli dochodzącym do 6,5% i przy pH do 9,6. Redukują błękit metylenowy do formy leuko, są odporne na telluryn potasowy (rosną przy stężeniach 0,06-0,1 %) i azydek sodowy (do 0,04%).

Do enterokoków należą gatunki: Enterococcus faecalis (w przewodzie pokarmowym człowieka), E. zymogenes, E. liąuefaciens, E. durans, E.faecium (u świń) i E. bovis (u bydła). Enterokoki należą do drobnoustrojów niewymagających pod względem żywieniowym, dobrze rosną na zwykłych podłożach. Występują w postaci komórek gramdodatnich, nieco wydłużonych w układzie dwoinek lub krótkich łańcuszków. Sąkatalazoujemne, nieprzetrwalnikujące i nieruchliwe.

Ich duża odporność na temperaturę i inne czynniki wskazują na to, że mogą one być lepszym wskaźnikiem stanu sanitarnego i zanieczyszczeń kałowych niż bakterie z grupy coli. Odporność na niektóre związki, takie jak telluryn potasowy czy azydek sodowy, wykorzystano do oznaczania enterokoków wśród innych organizmów.